塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑盒使用說明書

塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑盒
 
主要用途
 
塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑是一種旨在使用三色染料（trichrome），分析和區(qū)分存檔中的塑料包埋組織切片中的類骨質膠原纖維的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。主要適用于環(huán)氧樹脂類、聚甲基丙烯酸甲酯（methacrylate）、鄰苯二甲酸乙二醇（BMA）等包埋的骨組織切片類骨質的鑒別分析。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。
 
技術背景
 
類骨質（osteoid）是骨基質中未礦物化（unmineralized）的有機部分，一旦礦物化，將產(chǎn)生新生骨組織。90%的類骨質由I型膠原纖維組成�；�于戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）三色系統(tǒng)的方法，提供了鮮明的對比，即呈現(xiàn)綠色的礦物化骨質成分和呈現(xiàn)紅色的未礦物化的致密的膠原纖維（類骨質）。 
 
產(chǎn)品內容
 
清理液（Reagent A）  200毫升
韋格液A（Reagent B）    5毫升
韋格液B（Reagent C）    5毫升
酸性液（Reagent D）   30毫升
染色液A（Reagent E）   10毫升
修正液（Reagent F）   50毫升
染色液B（Reagent G）        10毫升
染色液C（Reagent H）   10毫升
產(chǎn)品說明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里，避免光照；試劑具有腐蝕性，注意安全；有效保證3月
 
用戶自備
 
小型玻璃染色缸：用于組織或切片處理的容器
控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈：用于樣品反應孵育
中性樹脂：用于切片封片
光學顯微鏡：用于切片染色后觀察分析
 
 
 
實驗步驟
 
樣本染色開始前，將試劑盒里的試劑置于室溫下預熱，并避光。然后分別移取100微升韋格液A（Reagent B）和韋格液B（Reagent C）到1.5毫升離心管里，充分混勻后，標記為韋格工作液，即刻使用。
 

• 準備好1至2微米厚的塑料包埋的切片
• 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育，直至液體干化
• 小心加入200微升韋格工作液在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去韋格工作液
• 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升酸性液（Reagent D）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育30秒（注意：避免液體干化）
• 小心移去酸性液（Reagent D）
• 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心加入200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升染色液A（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液A（Reagent E）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液B（Reagent G）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液B（Reagent G）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液C（Reagent H）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液C（Reagent H）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 放上蓋玻片或封片（中性樹脂）
• 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：

細胞核――呈現(xiàn)藍灰色
類骨質――呈現(xiàn)橘紅色
礦物化骨組織――呈現(xiàn)綠色
軟骨組織——呈現(xiàn)紫色
 
注意事項
 
本產(chǎn)品為50次操作

• 操作時，須戴手套
• 試劑具有腐蝕性，注意操作安全 
• 試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
• 整個操作，在避光狀態(tài)下進行
• 孵育時間可以根據(jù)樣品的不同、染色深淺的不同而延長或縮短
• 染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察 
• 樣品染色后保存，避免光照
• 本公司提供系列特定組織染色試劑產(chǎn)品

 
質量標準
 

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰