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30分鐘的精確定量-染料法熒光定量PCR

瀏覽次數(shù):791 發(fā)布日期:2020-5-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
     【前情回顧】
 
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       聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),又稱為PCR,是眾所周知的分子生物學(xué)技術(shù)之一,可以說占據(jù)了整個分子生物學(xué)領(lǐng)域的半壁江山。PCR技術(shù)除了廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究外,隨著近年來,以PCR為基礎(chǔ)的分子診斷技術(shù)在臨床診斷各種疾病的應(yīng)用,提高了疾病的正確診斷率,給各種疾病的治療帶來了極大的便利,特別是在本次爆發(fā)的新冠病毒肺炎疫情中,更是體現(xiàn)了其舉足輕重的作用。
       大體來說,PCR實驗主要包括三大主要的熱循環(huán)步驟:變性、退火、延伸。對于不同的實驗應(yīng)用,PCR的設(shè)置可能做相應(yīng)的調(diào)整,以獲得一些特殊的實驗結(jié)果,如產(chǎn)率提高,特異性增強(qiáng)或反應(yīng)時間縮短等.
 
       多年以來,PCR的基本原理一直未變,但隨著DNA聚合酶和試劑性能的大幅提升,以及其他相關(guān)材料的不斷創(chuàng)新,PCR實驗方法也在不斷改進(jìn)。
 
       我們之前對一部分PCR類型做了相關(guān)文章介紹,感興趣的同學(xué)可以點擊上方鏈接了解一下。今天小編為大家介紹一個PCR家族的新成員——快速PCR。首先看一下快速PCR家族第一位成員:染料法熒光定量PCR
 
       快速染料法qPCR (SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix)
 
       這款mix最大的特點是什么呢?快,快,快,既精確又快!
 
       SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix是一款來自歐盟的專業(yè)PCR品牌SolisBiodyne,以其獨家的蛋白質(zhì)穩(wěn)定專利技術(shù)為基礎(chǔ),研發(fā)出極其穩(wěn)定且可以快速定量的PCR Mixes,尤其是可以快速定量低濃度樣本;并且其可適用于市面上多種PCR熱循環(huán)儀。
       該qPCR mix含有新型的硅修飾的DNA聚合酶,以及優(yōu)化的快速熱啟動緩沖液和專利的SolisGreen®染料 ,目前產(chǎn)品有兩種類型:含有陽性參照染料ROX,或者不含有ROX。
 
       優(yōu)勢大集錦
 
     (一個集美貌與才華與一身的qPCR mix~·~)
 
       2倍速定量目的基因(與標(biāo)準(zhǔn)染料法qPCR相比);
       尤其適用于低濃度的樣本
       更靈敏的DNA染料SolisGreen® dye
       更精確定量
       常溫運輸
       兼容大部分的熱循環(huán)儀
 
       30分鐘跑完qPCR!
 
 
       圖1,對比常規(guī)qPCR mix 與SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix 在三種不同的PCR儀器上進(jìn)行qPCR, SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix 可為您節(jié)約一半的時間。
 
       精確而靈敏的基因定量 
 



 
       圖2,3. 75 bp大小的B2M基因片段的擴(kuò)增。使用SolisFAST®SolisGreen®qPCR Mix稀釋人cDNA(100 ng–10 pg,每個濃度重復(fù)3次),在Mic qPCR循環(huán)儀(Bio Molecular Systems)上進(jìn)行qPCR。 熱循環(huán)條件:先95°C 30秒,再95°C 5秒,60°C 20秒循環(huán)。
 
       兼容多種PCR儀
 
       SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix (含有ROX)可兼容的儀器如下:
       Applied Biosystems: 7500, 7500 Fast, ViiA™ 7, QuantStudio™ 3*, 5, 6 Flex, 7 Flex, 12K Flex
       Agilent/Stratagene: Mx3000P™, Mx3005P™, Mx4000™
       SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix ( 不含 ROX)可兼容的儀器如下:
       Bio-Rad: CFX96™, CFX384™
       Bio-Rad: iQ™5, MyiQ™, Chromo4™, Opticon®2; MiniOpticon®
       Bio Molecular Systems: Mic
       Eppendorf: Mastercycler® ep Realplex
       Qiagen: Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000, Rotor-Gene® Q
       Thermo Scientific: PikoReal™
       Illumina: The Eco™
       Roche Applied Science: LightCycler® 480, LightCycler® Nano, LightCycler® 96
 
多種規(guī)格可選的染料法快速qPCR 產(chǎn)品表為您呈上!
 
產(chǎn)品名稱 貨號 規(guī)格(ml) 濃度
SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix (ROX) 28-46-0000S 0.2 5x
28-46-0001 1 5x
28-46-0001-5 5x1 5x
28-46-00020 20 5x
SolisFAST® SolisGreen® qPCR Mix ( no ROX) 28-41-0000S 0.2 5x
28-41-0001 1 5x
28-41-0001-5 5x1 5x
28-41-00020 20 5x
       下一期,我們再聊聊探針法快速qPCR~~~
 
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       艾美捷科技有限公司,通過提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈管理,為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。我們的企業(yè)的核心價值觀:“激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越”。激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力,提供有競爭力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù),持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價值是我們的企業(yè)使命。我們的企業(yè)愿景是成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。
 
       作為一家具有尖端的技術(shù)實力、一流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷國家級高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)團(tuán)隊-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們
 
       艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
 
       三點:
       企業(yè)使命:激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力,提供有競爭力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù),持續(xù)  為客戶創(chuàng)造最大價值。
       企業(yè)愿景:成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。
       艾美捷定位:通過提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈,為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。
       六觀:
       價值觀:激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越。
 
來源:艾美捷科技有限公司
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