基因組提取試劑盒使用方法
瀏覽次數(shù):677 發(fā)布日期:2023-8-8
來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
本操作標(biāo)準(zhǔn)說明書旨在提供詳細(xì)指導(dǎo),使用基因組提取試劑盒從血液樣本中提取血液基因組DNA 的詳細(xì)步驟。
一、實驗試劑及實驗耗材的準(zhǔn)備:
- 天根基因組提取試劑盒
- 血液樣本
- 離心管
- 移液管和吸頭
- 微離心機
- 振蕩器
- 乙醇
- RNase A
- 蒸餾水
二、實驗步驟
1.樣本準(zhǔn)備
- 使用EDTA管收集血液樣本并標(biāo)記。
- 輕輕顛倒管子數(shù)次,確保充分混合。
2.溶解紅細(xì)胞
- 向2ml離心管中加入200μl血液裂解緩沖液。
- 將20μl血液樣本轉(zhuǎn)移到離心管中。
- 加入20μl蛋白酶K,輕輕顛倒均勻。
- 在56°C孵育混合物10分鐘,使紅細(xì)胞溶解。
3.DNA結(jié)合
- 向混合物中加入200μl結(jié)合緩沖液并充分混合。
- 以12,000 rpm離心管,離心1分鐘。不打擾沉淀物的同時廢棄上清液。
4.DNA洗滌
- 向離心管中加入500μl洗滌緩沖液I,使用高速離心機以12,000 rpm離心1分鐘,廢棄上清液。
- 重復(fù)使用洗滌緩沖液II進(jìn)行洗滌步驟,使用高速離心機以12,000 rpm離心2分鐘,廢棄上清液。
- 再次用使用離心機以12,000 rpm離心3分鐘以去除剩余的乙醇。
5.DNA洗脫
- 向沉淀物中加入50-100μl洗脫緩沖液。
- 在室溫下孵育離心管5分鐘以洗脫DNA。
- 以12,000 rpm離心2分鐘,收集洗脫的DNA溶液。
6.定量和儲存
- 使用分光光度計或適當(dāng)?shù)腄NA定量方法測量DNA的濃度和純度。
- 將提取的DNA儲存于-20°C低溫冰箱中,供以后使用。
三.天根基因組提取試劑盒 使用注意事項
- 在整個操作過程中,佩戴適當(dāng)?shù)膫人防護(hù)設(shè)備,如手套和實驗服。
- 遵循良好的實驗室實踐,保持清潔的工作環(huán)境。
- 按照天根基因組提取試劑盒的使用說明書進(jìn)行操作。
四、故障排除
- 如有任何困難或意外結(jié)果,請參考天根基因組提取試劑盒手冊的故障排除部分或咨詢技術(shù)支持。
提示:本操作標(biāo)準(zhǔn)說明書為使用天根基因組提取試劑盒從血液中提取基因組DNA提供了一般指南。用戶應(yīng)遵循試劑盒手冊的說明,并根據(jù)具體需求和樣本類型的變化自定義協(xié)議。
本操作標(biāo)準(zhǔn)旨在確保使用天根基因組提取試劑盒進(jìn)行高質(zhì)量的DNA提取,并標(biāo)準(zhǔn)化過程以獲得一致可靠的結(jié)果。