(一)原理
細(xì)胞培養(yǎng)(Cell culture)是模擬機(jī)體內(nèi)生理條件，將細(xì)胞從機(jī)體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞工程等領(lǐng)域，發(fā)展成一種重要生物技術(shù)，并取得顯著成就。由體內(nèi)直接取出組織或細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)細(xì)胞離體時間短，性狀與體內(nèi)相似，適用于研究。一般說來，幼稚狀態(tài)的組織和細(xì)胞，如：動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進(jìn)行原代培養(yǎng)。
(二)操作
1．取材
用頸椎脫位法使乳兔迅速死亡。然后，把整個動物浸入盛有75％乙醇的燒杯中數(shù)秒鐘消毒，取出后放在大平皿中攜入超凈臺。用消過毒的剪刀剪開用碘酒和乙醇再次消毒后的皮膚，剖腹取出肝臟或腎臟。置于無菌平皿中。
2．切割
用滅菌的PBS液將取出的臟器清洗三次，然后用眼科手術(shù)剪刀仔細(xì)將組織反復(fù)剪碎，直到成1mm3左右的小塊，再用PBS清洗，洗到組織塊發(fā)白為止。移入無菌離心管中，靜置數(shù)分鐘，使組織塊自然沉淀到管底，棄去上清。
3．消化、接種培養(yǎng)
吸取0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液1ml，加入離心管中，與組織塊混勻后，加上管口塞子，37℃水浴中消化8～10分鐘，每隔幾分鐘搖動一下試管，使組織與消化液充分接觸，靜止，吸去上清，向離心管中加入5～10ml含5％小牛血清的MEM培養(yǎng)基，用吸管吹打混勻，移入二個培養(yǎng)瓶中，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(三)結(jié)果
細(xì)胞接種后一般幾小時內(nèi)就能貼壁，并開始生長，如接種的細(xì)胞密度適宜，5天到一周即可形成單層。
傳代細(xì)胞培養(yǎng)
(一)原理
體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增3～6次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。
常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)／100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)3～5％。細(xì)胞接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力最好時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗。
(二)操作
1．將長成單層的原代培養(yǎng)細(xì)胞或HeLa細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置5～10分鐘。
2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變園，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即
在超凈臺中將消化液倒掉，加入3～5ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。
3．將細(xì)胞懸液吸出2ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
(三)結(jié)果
一般情況，傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，2～4天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
三、器材及液體的準(zhǔn)備和無菌操作的注意事項
(一)器材和液體的準(zhǔn)備
細(xì)胞培養(yǎng)用的玻璃器材，如：培養(yǎng)瓶、吸管等在清洗干凈以后，裝在鋁盒和鐵筒中，120℃，2小時干烤滅菌后備用；手術(shù)器材、瓶塞、配制好的PBS液用滅菌鍋15磅，20分鐘蒸氣滅菌；MEM培養(yǎng)液、小牛血清、消化液用G6濾器負(fù)壓抽濾后備用。
(二)無菌操作中的注意事項
在無菌操作中，一定要保持工作區(qū)的無菌清潔。為此，在操作前要認(rèn)真地洗手并用75％乙醇消毒。操作前20～30分鐘起動超凈臺吹風(fēng)。操作時，嚴(yán)禁說話，嚴(yán)禁用手直接拿無菌的物品，如瓶塞等，而要用器械，如止血鉗、鑷子等去拿。培養(yǎng)瓶要在超凈臺內(nèi)才能打開瓶塞，打開之前用乙醇將瓶口消毒，打開后和加塞前瓶口都要在酒精燈上燒一下，打開瓶口后的操作全部都要在超凈臺內(nèi)完成。操作完畢后，加上瓶塞，才能拿到超凈臺外。使用的吸管在從消毒的鐵筒中取出后要手拿末端，將尖端在火上燒一下，戴上膠皮乳頭，然后再去吸取液體�？傊�，在整個無菌操作過程中都應(yīng)該在酒精燈的周圍進(jìn)行。
【本平臺合作項目】
分子診斷、病理診斷、藥效學(xué)評價、毒理學(xué)實驗、細(xì)胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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公司簡介
重慶威斯騰生物醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司（簡稱“威斯騰生物”）是重慶高圣醫(yī)藥有限責(zé)任公司參與組建，放眼于全球生物醫(yī)藥前沿技術(shù)轉(zhuǎn)化應(yīng)用開發(fā)，立足于全國生物醫(yī)藥研發(fā)檢測合作及項目孵化、成果轉(zhuǎn)化，現(xiàn)在發(fā)展為一家集生物醫(yī)藥技術(shù)轉(zhuǎn)化、分子診斷產(chǎn)品開發(fā)及創(chuàng)新生物藥物開發(fā)的科技集團(tuán)公司。威斯騰生物致力于重大疾病包括惡性腫瘤、重大傳染病等領(lǐng)域的早期篩查及快速檢測。公司總部設(shè)立于重慶高新區(qū)，同時在上海和北京設(shè)有管理團(tuán)隊和運行機(jī)構(gòu)。
威斯騰生物擁有專家顧問團(tuán)隊千人專家7人，長江學(xué)者2人，海外院士2人；現(xiàn)有固定研發(fā)人員100余人同時還擁有320人的海外科研顧問團(tuán)隊。擁有完善的基礎(chǔ)實驗平臺、先進(jìn)的實驗設(shè)備、專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊、標(biāo)準(zhǔn)的操作流程、優(yōu)質(zhì)的合作平臺和強(qiáng)大的科學(xué)家網(wǎng)絡(luò)，可為國內(nèi)外研發(fā)機(jī)構(gòu)與藥企提供專業(yè)的生物研發(fā)檢測合作和科技成果轉(zhuǎn)化項目指導(dǎo)。七大基礎(chǔ)服務(wù)平臺包括：細(xì)胞生物學(xué)研究平臺、分子生物學(xué)研究平臺、病理學(xué)研究平臺、免疫學(xué)研究平臺、動物模型研究平臺、蛋白質(zhì)與多肽研究平臺、測序和芯片研究平臺。此外，公司擁有四大創(chuàng)新研發(fā)中心：分子診斷開發(fā)平臺,CRISPR/Cas9靶向基因修飾藥物開發(fā)平臺、納米靶向載藥創(chuàng)新平臺、創(chuàng)新藥物篩選平臺，除了進(jìn)行公司的研發(fā)項目外，還可為從事相關(guān)研究的團(tuán)隊和企業(yè)提供個性化服務(wù)。
威斯騰生物研發(fā)中心一直致力于高端分子診斷產(chǎn)品的創(chuàng)新研發(fā)，擁有國內(nèi)外處于領(lǐng)先地位的核心技術(shù)包括超微量核酸快速提取技術(shù)、快速熒光原位雜交（FISH）技術(shù)，CRISPR/Cas9基因定點編輯技術(shù)，熒光量子點材料開發(fā)和運用，醫(yī)學(xué)模式動物開發(fā)等。
重點研發(fā)領(lǐng)域包括肺癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤的快速早期診斷，目前已成功開發(fā)非小細(xì)胞肺癌快速FISH診斷試劑盒、乳腺癌快速FISH診斷試劑盒、超微量糞便核酸快速診斷結(jié)直腸癌試劑盒等產(chǎn)品，其中非小細(xì)胞肺癌快速FISH診斷試劑盒入選重慶市技術(shù)創(chuàng)新與應(yīng)用示范專項（產(chǎn)業(yè)類）重點研發(fā)項目名單，獲中國生物醫(yī)藥創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項目最具投資價值TOP10評選賽北京站榮獲一等獎、第八屆中國創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)大賽生物醫(yī)藥行業(yè)組重慶賽區(qū)冠軍等。
同時，公司在重大傳染病的快速檢測及診斷上進(jìn)行了研發(fā)布局，包括結(jié)核、EV71手足口病等重大傳染病的快速診斷，擁有項目包括超微量尿液核酸檢測結(jié)核試劑盒、量子點熒光標(biāo)記傳染病快速檢測試劑盒等。新冠病毒疫情爆發(fā)后，威斯騰生物第一時間組建“新型冠狀病毒試劑盒緊急研究小組”及“新型冠狀病毒研發(fā)物資采購小組”，自籌經(jīng)費成功研發(fā)新型冠狀病毒（2019-nCoV）快速核酸檢測試劑盒（免核酸提取熒光PCR一步法）、新冠病毒糞便RNA核酸提取試劑盒。產(chǎn)品已提供給20家以上的疾控中心和公共衛(wèi)生中心使用，并與以上第三方疾控中心/公共衛(wèi)生中心建立起了長期穩(wěn)定的試用關(guān)系。
威斯騰生物是國家高新技術(shù)企業(yè)、科技型企業(yè)、市級新型研發(fā)機(jī)構(gòu)、專精特新企業(yè)、北京市海淀區(qū)生物醫(yī)藥與大健康協(xié)會副會長單位、重慶市醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會副會長單位。下屬研發(fā)平臺被認(rèn)定為“中關(guān)村生物醫(yī)藥共享平臺”、“中關(guān)村海淀區(qū)生物醫(yī)藥公共研發(fā)檢測平臺”、“重慶市生物醫(yī)藥檢測共享平臺”等。公司多次在全國性比賽中獲獎，2019年榮榮獲第八屆中國創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)大賽生物醫(yī)藥行業(yè)組重慶賽區(qū)冠軍。
同時，威斯騰生物積極參與國際技術(shù)轉(zhuǎn)移、成果轉(zhuǎn)化相關(guān)合作，與美國、澳大利亞、新加坡等相關(guān)高校、研究院所建立了深厚的聯(lián)系和多元化的合作，公司堅持以“技術(shù)創(chuàng)新、機(jī)制創(chuàng)新，文化創(chuàng)新，管理創(chuàng)新，戰(zhàn)略創(chuàng)新”的理念，為重大惡性腫瘤、傳染病疾病等領(lǐng)域的創(chuàng)新研發(fā)而不懈努力。
核心競爭力
- 熒光量子點材料開發(fā)和運用
- 快速熒光原位雜交（FISH）
- CRISPR/Cas9基因定點編輯技術(shù)
- 基因芯片診斷
- ChIP表觀遺傳研究
- 醫(yī)學(xué)模式動物開發(fā)
產(chǎn)業(yè)布局：
- 科技服務(wù)
- ctDNA,CTC液體活檢
- 病理醫(yī)學(xué)診斷
- PDX腫瘤篩查
- POCT產(chǎn)品開發(fā)
- IVD產(chǎn)品開發(fā)
- 分子醫(yī)學(xué)診斷
- 創(chuàng)新研發(fā)系統(tǒng)
行業(yè)交流
2015年12月 由中國醫(yī)藥企業(yè)發(fā)展促進(jìn)會、中國醫(yī)藥科技成果轉(zhuǎn)化中心主辦，重慶市醫(yī)藥 產(chǎn)業(yè)發(fā)展辦公室指導(dǎo)，威斯騰生物醫(yī)藥承辦的“首屆2015·中國（重慶）生物醫(yī)藥前沿技術(shù)與產(chǎn)業(yè)化發(fā)展研討會”在重慶渝州賓館隆重舉行；
2016年4月 新加坡工程院院士、美國電子工程院連勇院士到威斯騰生物醫(yī)藥交流訪問；
2016年6月 美中藥協(xié)（SAPA）總會前會長、美國強(qiáng)生公司研發(fā)總監(jiān)、美國藥學(xué)家協(xié)會院士戴衛(wèi)國博士到威斯騰生物醫(yī)藥交流訪問；
2016年6月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加第二屆藥學(xué)進(jìn)展前沿高峰論壇；
2016年8月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加2016北京生物醫(yī)藥科技成果展示暨項目推介會；
2016年10月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加“科技部科技成果直通車暨首屆科技成果路演活動”；
2016年10月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加2016中國（泰州）抗體藥物高峰論壇；
2016年11月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加中國醫(yī)藥企業(yè)發(fā)展促進(jìn)會第三次會員代表大會；
2016年11月 威斯騰生物醫(yī)藥成為諾獎醫(yī)學(xué)峰會投資委員會常務(wù)委員單位；
2016年12月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加北京市海淀區(qū)生物與健康產(chǎn)業(yè)協(xié)會第一屆會員大會暨2016中關(guān)村核心區(qū)生物與健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇；
2017年1月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加首屆國際未來論壇；
2017年1月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加第二屆中國天使兩會雙創(chuàng)年度盛典；
2017年3月 北京生物技術(shù)和新醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)促進(jìn)中心潘悅主任一行到威斯騰生物醫(yī)藥交流訪 問；
2017年4月 威斯騰生物醫(yī)藥受邀參加四川省人民政府主辦的醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)深度合作和創(chuàng)新發(fā)展座談會。
企業(yè)文化
公開透明的競爭文化機(jī)制
競爭文化的培養(yǎng)是企業(yè)文化著重培養(yǎng)的重要內(nèi)容，良好的競爭氛圍使每位員工不甘落后和停滯。采取正確的競爭策略，能夠極大地調(diào)動企業(yè)員工的積極性、創(chuàng)造性，煥發(fā)出競爭精神和創(chuàng)新精神，使人的潛能得到全面、充分地發(fā)揮，從而使整個企業(yè)的競爭能力得到全面地提高。
公開透明的競爭機(jī)制的建立，使每位員工看到并享有暢通的晉升通道，保證每位員工在威斯騰都能一展所長。
重視素質(zhì)培養(yǎng)和全面發(fā)展
威斯騰非常注重企業(yè)文化的建設(shè)，提倡“以人為本”的人才理念，關(guān)注員工的持續(xù)成長，倡導(dǎo)正能量，形成“勤奮，忠誠，熱情，向上”的企業(yè)文化。
素質(zhì)是人的品質(zhì)、能力、素養(yǎng)的總稱，企業(yè)員工的職業(yè)素質(zhì)是影響企業(yè)管理與發(fā)展的重要因素。高素質(zhì)的人才，不在于經(jīng)驗的長久，而在于長久的經(jīng)驗培育出來的能力。提升員工素質(zhì)是揭示各個方面及競爭力的利器。員工個人不僅可以參加企業(yè)組織的各種培訓(xùn)，還主動積極的進(jìn)行自我學(xué)習(xí)與提高，不斷的修煉自我，提高自身的職業(yè)素質(zhì)，從而達(dá)到與時俱進(jìn)，增強(qiáng)競爭力。
和諧“家”文化
公司提倡和諧“家”文化，致力于為員工提供良好的辦公環(huán)境、營造輕松舒適的辦公氛圍，公司在對員工關(guān)懷上下足了工夫，讓每一位企業(yè)員工真正感受企業(yè)文化的力量。”威斯騰管理委員會委員如是表示。一個好的公司，不能僅僅只注重品牌的打造，更要重視人才、重視技術(shù)、重視企業(yè)文化建設(shè)。這就是一個富有朝氣，活力的威斯騰生物！
