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逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝
我們保證:1) 制備的病毒顆粒攜帶片段的正確性2) 病毒顆粒的總數(shù)和病毒滴度:如無特殊要求我們提供1mL 滴度為1×106 - 1×109 個病毒基因組 / mL 的病毒儲液。
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最后更新:2011-8-23半年訪問:16
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逆轉(zhuǎn)錄病毒 (Retrovirus) 是一類已知的RNA 病毒。需在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下首先將RNA 轉(zhuǎn)變?yōu)?br /> cDNA,再在DNA 復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯等蛋白酶作用下擴增的一類病毒。該載體系統(tǒng)有兩部分組成,一是
帶有外源基因的重組反轉(zhuǎn)錄病毒載體分子,二是能以反式提供病毒結(jié)構(gòu)蛋白的包裝細(xì)胞,其要求是能高
效產(chǎn)生感染靶細(xì)胞的重組病毒顆粒,且無野生型的反轉(zhuǎn)錄病毒存在,后者是基因治療安全性的關(guān)鍵問題。


逆轉(zhuǎn)錄病毒載體最大優(yōu)點是:
(1) 轉(zhuǎn)染范圍廣,可以感染各種細(xì)胞類型,如淋巴細(xì)胞或肝細(xì)胞、肌細(xì)胞等;
(2) 轉(zhuǎn)入的外源基因可完全整合;
(3) 對細(xì)胞感染率高,達(dá)到100 %;
(4) 感染細(xì)胞不產(chǎn)生病變,可建立細(xì)胞系長期持續(xù)表達(dá)外源基因。


逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的不足之處,如:
(1) 只能整合至分裂期細(xì)胞;
(2) 可插入外源基因片斷小(<10kb),難以滿足較大基因的插入;
(3) 病毒滴度是限制臨床應(yīng)用的主要方面;
(4) 有產(chǎn)生野生型病毒或輔助型病毒的可能,隨機整合可能產(chǎn)生不良作用。

逆轉(zhuǎn)錄包裝質(zhì)粒:
過表達(dá)質(zhì)粒:pMSCVneo Retroviral Vector (Clontech)
SiRNA表達(dá)質(zhì)粒:RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen (Clontech)、
包裝細(xì)胞:PT67細(xì)胞

我們保證:1) 制備的病毒顆粒攜帶片段的正確性2) 病毒顆粒的總數(shù)和病毒滴度:如無特殊要求我們
提供1mL 滴度為1×106 - 1×109 個病毒基因組 / mL 的病毒儲液
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