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siRNA/microRNA/過表達(dá)慢病毒包裝（慢病毒載體構(gòu)建，慢病毒包裝，滴度測(cè)定)
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| 服務(wù)商： 百奧邁科生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
慢病毒載體包裝服務(wù)
1 特點(diǎn)：
1） 直接包裝成為假病毒顆粒，對(duì)分裂和非分裂細(xì)胞均有感染作用，適合研究和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中
難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞 (比如神經(jīng)元細(xì)胞、干細(xì)胞或其它原代細(xì)胞)。
2） 可以通過簡單方式，在短時(shí)間內(nèi)獲得穩(wěn)定表達(dá)特定基因的多種細(xì)胞株。
3） 可用于基因敲除、基因治療和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究。
4） 無需任何轉(zhuǎn)染試劑，操作簡便。
5） 可以根據(jù)客戶需要制備多種標(biāo)記。
2 原理：
慢病毒（Lentivirus）是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種。，一方面可以擴(kuò)增替代瞬時(shí)表達(dá)載體使用，
另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆經(jīng)過慢病毒包裝系統(tǒng)包裝后，可用于感染依靠傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)
染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞，并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞
的基因組，進(jìn)行長時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。
3 慢病毒包裝簡要流程：
1） 含有目的基因的慢病毒siRNA/microRNA載體或過表達(dá)載體的構(gòu)建和質(zhì)粒純化提取。
2） 慢病毒載體，包裝系統(tǒng)共轉(zhuǎn)染病毒包裝細(xì)胞。
3） 培養(yǎng)48hrs - 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培養(yǎng)液。
4） 病毒的純化和濃縮。
5） 分裝、- 80 oC 保存。
6） 滴度測(cè)定目的基因檢定，并出具檢測(cè)報(bào)告。
4 本公司提供的最終產(chǎn)品包括：
1） 重組后的慢病毒載體質(zhì)粒以及測(cè)序圖譜。
2） 產(chǎn)品無菌檢測(cè)結(jié)果。
3） 慢病毒儲(chǔ)液及相應(yīng)的病毒滴度。
我們保證：1) 制備的病毒顆粒攜帶片段的正確性2) 病毒顆粒的總數(shù)和病毒滴度：如無特殊要求我
們提供1mL 滴度為1×107 - 1×108 / mL 的病毒儲(chǔ)液。
