目前用于實驗研究及藥物靶點篩選的siRNA合成方法主要有兩種:載體介導(dǎo)表達(dá)siRNA和化學(xué)合成siRNA;瘜W(xué)合成siRNA具有沉默效率較高的優(yōu)點,但在體內(nèi)的作用時間較短,且一次性消耗,無法獲得克隆;構(gòu)建siRNA質(zhì)?梢栽贓.coli內(nèi)復(fù)制擴(kuò)增,真核細(xì)胞內(nèi)作用時間較長,且質(zhì)?砷L期保存,同時可測序保證其100%序列同源性。
技術(shù)特點:
1)多種siRNA 表達(dá)載體,可以在細(xì)胞內(nèi)直接轉(zhuǎn)錄出siRNA,行使其RNAi 功能,包 括以下常用載體:
載體名稱 |
啟動子 |
篩選基因 |
標(biāo)記基因 |
pRNAi-U6.1/Neo |
U6 |
Neomycin |
GFP |
pRNAi-CMV3.2/Neo |
CMV |
Neomycin |
GFP |
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) |
CMV |
Neomycin |
|
2)載體帶有GFP 標(biāo)簽可以監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率。構(gòu)建好的siRNA 表達(dá)載體可直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行RNAi 實驗;
3)本公司還可根據(jù)客戶需要提供各種商業(yè)化表達(dá)載體;
4)本公司可以為客戶構(gòu)建線性siRNA 表達(dá)載體,shRNA 表達(dá)載體,miRNA 表達(dá)載體以及病毒型RNAi 載體。
構(gòu)建流程:
1)siRNA 靶點設(shè)計;
- 客戶提供靶基因的siRNA 序列,由本公司將其克隆到siRNA 表達(dá)載體上。
- 客戶提供靶基因的相關(guān)信息(基因的mRNA 序列或Genbank Accession No.), 根據(jù)客戶要求,本公司設(shè)計高效特異性的3-4 條針對靶基因的siRNA,并可免費提供陰性和陽性對照質(zhì)粒,便于客戶使用。
2)合成設(shè)計好的DNA 并退火形成雙鏈DNA,克隆到客戶要求的載體上。
3)通過測序進(jìn)行驗證。
4)構(gòu)建成功的siRNA 質(zhì)粒連同測序報告、產(chǎn)品說明書一起寄送到客戶手中。
質(zhì)量保證:
符合設(shè)計要求的siRNA 序列測序結(jié)果和實驗報告。
siRNA/shRNA載體構(gòu)建 報價表:
服務(wù)內(nèi)容 |
報價 |
單獨構(gòu)建一條 siRNA/shRNA載體 |
1000元 |
構(gòu)建3-4條siRNA/shRNA 載體 |
800元/條 |
注:可根據(jù)客戶要求提供siRNA 的陽性及陰性對照質(zhì)粒。
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百奧邁科(Biomics)生物技術(shù)有限公司(原“百奧生物技術(shù)(南通)有限公司)是由國家級“千人計劃”引進(jìn)人才—朱遠(yuǎn)源博士率領(lǐng)的海歸團(tuán)隊于2006年在南通經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)創(chuàng)立,注冊資本1212萬美元,總投資2500萬美元。工業(yè)用地100畝,其中已建有一期一萬平方米的國際標(biāo)準(zhǔn)生物廠房,設(shè)有一流的生產(chǎn)研發(fā)技術(shù)和設(shè)備。在目前近100名員工中,專業(yè)人員占78%,各團(tuán)隊均由國際一流的科學(xué)家及管理人才領(lǐng)軍。經(jīng)過三年多的發(fā)展,公司取得了矚目的成績,已獲得國內(nèi)外發(fā)明專利11項;具備了全國最大規(guī)模的生物及化學(xué)合成文庫和基因藥物靶點篩選的條件;是亞洲領(lǐng)先的藥物研發(fā)公司,也是全球極少數(shù)集小核酸文庫合成、藥物靶點篩選、小核酸結(jié)構(gòu)修飾、藥物傳輸系統(tǒng)等四大技術(shù)平臺于一體的小核酸產(chǎn)業(yè)化基地之一。
公司建有核酸藥物研發(fā)、生命科學(xué)及化學(xué)合成等三大研發(fā)/生產(chǎn)中心,并在美國西雅圖和硅谷設(shè)立了“平臺對接”的小核酸藥物研發(fā)中心和銷售平臺。2009年,百奧邁科投資成立了江蘇吉康生物技術(shù)有限公司(子公司),將小核酸率先運用到皮膚美容及皮膚病領(lǐng)域,成為國際上首家小核酸健康產(chǎn)品的供應(yīng)商。
目前公司已經(jīng)形成以科研試劑和技術(shù)外包服務(wù)為短線產(chǎn)品、以祛斑美白小核酸特效皮膚系列產(chǎn)品為中線產(chǎn)品以及以第三代生物制藥及核酸藥物研發(fā)、生產(chǎn)和銷售為長線產(chǎn)品的商務(wù)模式,其中正在研發(fā)的治療老年黃斑變性(AMD)、肝癌、乙型肝炎等疾病的多項小核酸藥物均已達(dá)到國際前沿水平,某些方面已取得突破性進(jìn)展,達(dá)到國際先進(jìn)水平并填補了同行業(yè)空白。百奧邁科將專注于開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的小核酸產(chǎn)品藥物,致力于解決人類疑難雜癥,造福人類衛(wèi)生健康事業(yè)。
公司還利用獨有的專利技術(shù)和相關(guān)技術(shù)平臺先后與澳大利亞本尼特(Benitec)公司和以色列Zetiq技術(shù)公司等進(jìn)行了藥物研發(fā)及診斷試劑的國際合作。