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siRNA/shRNA載體構(gòu)建
siRNA/shRNA載體構(gòu)建
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問:1620
最后更新:2012-2-28半年訪問:20
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服務(wù)商: 百奧邁科生物技術(shù)有限公司 查看該公司所有服務(wù) >>
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目前用于實驗研究及藥物靶點篩選的siRNA合成方法主要有兩種:載體介導(dǎo)表達(dá)siRNA和化學(xué)合成siRNA;瘜W(xué)合成siRNA具有沉默效率較高的優(yōu)點,但在體內(nèi)的作用時間較短,且一次性消耗,無法獲得克隆;構(gòu)建siRNA質(zhì)?梢栽贓.coli內(nèi)復(fù)制擴(kuò)增,真核細(xì)胞內(nèi)作用時間較長,且質(zhì)?砷L期保存,同時可測序保證其100%序列同源性。

  

技術(shù)特點:
1)多種siRNA 表達(dá)載體,可以在細(xì)胞內(nèi)直接轉(zhuǎn)錄出siRNA,行使其RNAi 功能,包  括以下常用載體:
 
載體名稱 啟動子 篩選基因 標(biāo)記基因
pRNAi-U6.1/Neo  U6  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV3.2/Neo  CMV  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) 
CMV  Neomycin     
2)載體帶有GFP 標(biāo)簽可以監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率。構(gòu)建好的siRNA 表達(dá)載體可直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行RNAi 實驗;
3)本公司還可根據(jù)客戶需要提供各種商業(yè)化表達(dá)載體;
4)本公司可以為客戶構(gòu)建線性siRNA 表達(dá)載體,shRNA 表達(dá)載體,miRNA 表達(dá)載體以及病毒型RNAi 載體。
 
構(gòu)建流程:
1)siRNA 靶點設(shè)計;
  • 客戶提供靶基因的siRNA 序列,由本公司將其克隆到siRNA 表達(dá)載體上。
  • 客戶提供靶基因的相關(guān)信息(基因的mRNA 序列或Genbank Accession No.),  根據(jù)客戶要求,本公司設(shè)計高效特異性的3-4 條針對靶基因的siRNA,并可免費提供陰性和陽性對照質(zhì)粒,便于客戶使用。

2)合成設(shè)計好的DNA 并退火形成雙鏈DNA,克隆到客戶要求的載體上。
3)通過測序進(jìn)行驗證。
4)構(gòu)建成功的siRNA 質(zhì)粒連同測序報告、產(chǎn)品說明書一起寄送到客戶手中。
質(zhì)量保證:
符合設(shè)計要求的siRNA 序列測序結(jié)果和實驗報告。

 siRNA/shRNA載體構(gòu)建 報價表: 

服務(wù)內(nèi)容 報價
單獨構(gòu)建一條 siRNA/shRNA載體  1000元
構(gòu)建3-4條siRNA/shRNA 載體 800元/條

注:可根據(jù)客戶要求提供siRNA 的陽性及陰性對照質(zhì)粒。
 

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