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分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建
DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質(zhì)粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經(jīng)過人工改造。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。
服務(wù)類別:分子與細胞總訪問:1547
最后更新:2024-5-17半年訪問:32
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分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建

分子克隆的相關(guān)載體:

DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質(zhì)粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內(nèi)必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區(qū)域內(nèi)。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。

服務(wù)要求:

 

1、請以Email等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。

2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括:PCR擴增產(chǎn)物;RT-PCR擴增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA片段等。

3、提供DNA片段的電泳照片,并請標明Marker有濃度。

4、提供載體來源與背景資料。

5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。

 

相關(guān)材料說明:

 

1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。

2、實驗中涉及的堿基序列請以EMAIL的形式發(fā)到我中心。

3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料:(質(zhì)粒大小,抗性,拷貝數(shù),多克隆位點等)如果是商品化載體,請您提供生產(chǎn)廠家及標準名稱;如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請注明大體結(jié)構(gòu)情況。

4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。

5、您自己提供的引物如果為干品,請您標注具體的OD數(shù),如果是液體態(tài),請您標明濃度。

6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。(最好同時提供相應(yīng)的質(zhì)粒);如果提供質(zhì)粒,則質(zhì)粒的量最好在4ug以上;如果提供的是PCR產(chǎn)物,則PCR產(chǎn)物量最好在5u以上(最好附上電泳圖)

7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應(yīng)首先在液氮中速凍,保存在-80度的冰箱中,使用干冰運輸。

 

結(jié)果提供:

 

1、相關(guān)的實驗說明和相關(guān)的酶切圖片。

2、測序的結(jié)果。

3、構(gòu)建好的載體和菌液各一份。

4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。

實驗完成時間:

1個月以內(nèi)

【本平臺合作項目】

分子診斷、病理診斷、藥效學評價、毒理學實驗、細胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)!

【全國免費熱線】:400-675-6758

【電話】 023-65316016,023-65316556

【郵箱】 china-western@163.com

【官網(wǎng)網(wǎng)址】www.cqwestern.com

【地址】 重慶高新區(qū)生物醫(yī)藥研發(fā)產(chǎn)業(yè)園D棟

 

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