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信諾金達(dá)使用Stratagene Mx3000P和AB StepOnePLUS實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，用染料法或Taqman探針法對 DNA/RNA 進(jìn)行real time PCR的定量測定或定性鑒定。
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定量PCR
Real-time qPCR就是在PCR擴(kuò)增過程中，通過熒光信號，對PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期，模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān) 系，所以成為定量的依據(jù)。由于Real-time qPCR的眾多優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)，并成為基因表達(dá)差異和文章發(fā)表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測，很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測，不知從何入手；甚至一些做過一些實(shí)驗(yàn)的研究者也會(huì)對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時(shí)候，盡管知曉qPCR的原理和基本操 作，仍然浪費(fèi)時(shí)間和精力，而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
信諾金達(dá)的real-time qPCR技術(shù)服務(wù)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康�，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案（相對定量或絕對定量；SYBR Green I或Taqman探針方法），用完全按照符合國際標(biāo)準(zhǔn)（MIQE）的real-time qPCR試劑完成實(shí)驗(yàn)，提供符合文章發(fā)表的客觀事實(shí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告和原始數(shù)據(jù)。
服務(wù)要求
需提供新鮮或保存完好的細(xì) 胞（至少5×106）、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料；或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性 好）或總DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之間，完整性好）；或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl（反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好，純度在 1.9-2.1之間）； 同時(shí)提供待測基因序列或登錄號。
報(bào)告內(nèi)容
總RNA(或DNA)濃度，電泳圖片，擴(kuò)增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析（可選），實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及剩余引物和模板（信諾金達(dá)可保存1個(gè)月）
實(shí)驗(yàn)報(bào)告部分組成
| 服務(wù)編號 | 服務(wù)項(xiàng)目 | 內(nèi)容說明 | 價(jià)格 | 周期 | |
| 相對定量SYBR Green I染料法 | 基礎(chǔ)費(fèi)用 | 引物合成，擴(kuò)增效率 | 詢價(jià) | 2-3周※ | |
| SGSQP01 | 樣品檢測費(fèi)用 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 詢價(jià) | ||
| SGSQP02 | 10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 詢價(jià) | |||
| SGSQP03 | 檢測樣品數(shù)＞20 | 詢價(jià) | 3-4周※ | ||
| 相對定量探針法 | 基礎(chǔ)費(fèi)用 | 包含一條探針合成和標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 詢價(jià) | 4-5周※ | |
| SGSQP04 | 樣品檢測費(fèi)用 | 檢測樣品數(shù)＜10 | |||
| SGSQP05 | 10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 詢價(jià) | |||
| SGSQP06 | 檢測樣品數(shù)＞20 | 詢價(jià) | |||
| 絕對定量探針法 | 基礎(chǔ)費(fèi)用 | 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)曲線，和一條探針合成 | 詢價(jià) | 4-5周※ | |
| SGSQP07 | 樣品檢測費(fèi)用 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 詢價(jià) | ||
| SGSQP08 | 10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 詢價(jià) | |||
| SGSQP09 | 檢測樣品數(shù)＞20 | 詢價(jià) | |||
| 絕對定量SYBR GreenI法 | 基礎(chǔ)費(fèi)用 | 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 詢價(jià) | 3-4周※ | |
| SGSQP10 | 樣品檢測費(fèi)用 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 詢價(jià) | ||
| SGSQP11 | 10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 詢價(jià) | |||
| SGSQP12 | 檢測樣品數(shù)＞20 | ||||
| miRNA SYBR Green I 相對定量 | 基礎(chǔ)費(fèi)用 | 引物合成，擴(kuò)增效率 | 詢價(jià) | 3-4周※ | |
| SGSQP13 | 樣品檢測費(fèi)用 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 詢價(jià) | ||
| SGSQP14 | 檢測樣品數(shù)≥20 | 詢價(jià) | |||
| SGSQP15 | 引物設(shè)計(jì)合成 | 設(shè)計(jì)引物，≤30堿基，2OD，PAGE級純化 | 詢價(jià) | 1周 | |
| SGSQP16 | 定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建 | 目的序列擴(kuò)增，連接到載體，質(zhì)�？截悢�(shù)確定 | 詢價(jià) | 1-2周 | |
定量PCR價(jià)格里不包括樣品制備費(fèi)用，如需cDNA，DNA制備，費(fèi)用另計(jì)。
※：一般情況下，3周左右可完成實(shí)驗(yàn)！若遇特殊原因，比如實(shí)驗(yàn)材料降解，需要重新提供樣品或者總RNA需要重新提�。换虮磉_(dá)量較低，需要構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品等情況，周期會(huì)有所延長。
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北京信諾金達(dá)生物科技有限公司
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