昆蟲細(xì)胞表達(dá)技術(shù)服務(wù)

 

我們的蛋白質(zhì)團隊在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計和構(gòu)建、融合對象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經(jīng)驗。可以滿足客戶個性化的需求。

 

 

 

昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)是應(yīng)用較多的真核表達(dá)系統(tǒng)，它可以在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)多種外源基因，包括真菌，植物，細(xì)菌，病毒的基因。桿狀病毒是一類 以昆蟲細(xì)胞為天然宿主的雙鏈DNA病毒，具有高度的種屬特異性，不感染脊椎動物，對人、畜無害。目前研究較多的是苜蓿銀紋夜蛾核多角體 (AcNPV) ，其宿主是草地貪夜蛾。而sf9細(xì)胞，正是桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的宿主細(xì)胞之一。sf9細(xì)胞屬于半貼壁型細(xì)胞系，可以進行懸浮培養(yǎng)，也可以進行貼壁培養(yǎng)，在應(yīng)用于蛋白的表達(dá)與制備純化中，有著許多的優(yōu)點。

1、與其他真核表達(dá)系統(tǒng)相比，外源基因表達(dá)水平高，特別是細(xì)胞內(nèi)蛋白。多數(shù)情況下，表達(dá)的重組蛋白可溶，折疊正確有翻譯后修飾（如糖基化等），有生物學(xué)活性，容易分離純化；

2、昆蟲細(xì)胞懸浮生長，容易放大培養(yǎng)，有利于大規(guī)模表達(dá)重組蛋白；

3、易于表達(dá)異源多聚體蛋白，可通過多種重組病毒同時感染昆蟲細(xì)胞細(xì)胞或用含有多個表達(dá)框的一種病毒感染昆蟲細(xì)胞來實現(xiàn)；

4、安全性。昆蟲桿狀病毒不感染脊椎動物。

 

百恩維生物提供桿狀病毒表達(dá)載體構(gòu)建、表達(dá)檢測以及從大容量細(xì)胞培養(yǎng)表達(dá)和蛋白純化等一站式蛋白表達(dá)技術(shù)服務(wù)。

 

1、 克隆目標(biāo)蛋白編碼序列到昆蟲桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上；

2、 制備重組質(zhì)粒；

3、 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞，制備病毒；

4、 病毒滴度測定

5、 重組蛋白表達(dá)驗證和條件優(yōu)化；

6、 小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（500 ml培養(yǎng)物）；

7、 大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（可選，適合于生物醫(yī)藥研究企業(yè)）。

 

相關(guān)技術(shù)服務(wù)：

昆蟲桿狀病毒制備技術(shù)服務(wù)：

 

蛋白表達(dá)優(yōu)化技術(shù)服務(wù)：
1、由客戶提供5－10ml重組桿狀病毒；
2、感染昆蟲細(xì)胞獲得高滴度病毒;
3、表達(dá)條件優(yōu)化。
優(yōu)化因素包括：

不同的昆蟲細(xì)胞系
不同的表達(dá)時間；
不同的感染復(fù)數(shù)（MOI）。
病毒滴度測定服務(wù)
空斑實驗測定滴度。

 

 

   

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