原核表達(dá)（E. coli ）技術(shù)服務(wù)

我們的蛋白質(zhì)團隊在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計和構(gòu)建、融合對象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經(jīng)驗�？梢詽M足客戶個性化的需求。

 

 

原核表達(dá)是將植物、動物、微生物等的目的基因插入合適載體后導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)出大量目的蛋白。這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應(yīng)用。大腸桿菌用于表達(dá)重組蛋白有以下優(yōu)點：易于生長和控制；易于培養(yǎng)，實驗耗費少；可選擇多種大腸桿菌菌株及與之匹配的具各種特性的質(zhì)粒。原核表達(dá)系統(tǒng)是迄今為止最為成熟可靠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。

原核表達(dá)技術(shù)服務(wù)按步驟收費，您可以選擇從以下任意一步開始提供服務(wù)或僅選擇其中的單獨一步，詳細(xì)價格請垂詢。
    如需前期分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)請參考相關(guān)內(nèi)容。

服務(wù)特色：

1、 一站式解決方案，從基因合成到蛋白表達(dá)純化，完成您的實驗設(shè)計。

2、 技術(shù)成熟穩(wěn)定/方法手段齊全。

3、 服務(wù)周期短。

 

1、 基因合成，

提供客戶：合成的基因及測序序列。

時間： 1~2周

2、 質(zhì)粒構(gòu)建，（表達(dá)載體的設(shè)計和構(gòu)建、融合對象和標(biāo)簽的選�。�

擴增并抽提構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒。
將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到高效的E. coli表達(dá)菌株中。
至少挑選數(shù)個陽性克隆于LB培養(yǎng)基中擴增并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。

電泳檢測，菌株中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。

提供客戶：重組質(zhì)粒的表達(dá)菌株及表達(dá)檢測報告。

時間： 1~2周

3、 搖瓶培養(yǎng)重組細(xì)菌，誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽（Tag），再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白（可選，構(gòu)建表達(dá)載體時需加入合適的蛋白酶切位點）。
百恩維會通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
提供客戶：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告�？砂纯蛻粢�求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)95%以上。時間 2~3周：

4、 大規(guī)模蛋白制備：

蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化

提供客戶：合格的目標(biāo)蛋白及服務(wù)報告。

時間：協(xié)商

 

5、 蛋白復(fù)性服務(wù)。
利用不同復(fù)性緩沖液的體系，對目標(biāo)蛋白進(jìn)行小量復(fù)性試驗提供復(fù)性后樣品供客戶檢測。 可根據(jù)客戶要求，按照其中一種樣品的復(fù)性條件制備小量的復(fù)性蛋白。 百恩維可提供具體的復(fù)性緩沖液配方及復(fù)性工藝。

其他：內(nèi)毒素去除，除菌，凍干等進(jìn)一步加工。
詳細(xì)檢測目標(biāo)蛋白的質(zhì)量。

提供客戶：加工后的終產(chǎn)品及相關(guān)實驗和檢測報告。
時間：1~2周

 

 

 

 

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