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目前百恩維生物能夠?yàn)槟峁┌╯iRNA 靶序列設(shè)計、質(zhì)粒構(gòu)建、測序等全方位服務(wù)。
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siRNA表達(dá)載體構(gòu)建
近年來的研究表明，將與mRNA對應(yīng)的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導(dǎo)入細(xì)胞，可以使mRNA發(fā)生特異性的降解，導(dǎo)致其相應(yīng)的基因沉默。這種轉(zhuǎn)錄后基因沉默機(jī)制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（RNAi）。通過構(gòu)建siRNA表達(dá)載體這種方法來制備siRNA，已成為進(jìn)行RNA干擾實(shí)驗(yàn)的常用手段之一。
目前百恩維生物能夠?yàn)槟峁┌╯iRNA 靶序列設(shè)計、質(zhì)粒構(gòu)建、測序等全方位服務(wù)。
1、siRNA表達(dá)載體的選用：百恩維生物選用的siRNA 表達(dá)載體含人的U6啟動子、Pol Ⅲ 終止子、氨芐抗性基因，可以建立穩(wěn)定表達(dá)系。
2、設(shè)計siRNA靶序列：
根據(jù)目的mRNA序列，設(shè)計3條RNA干擾靶序列，靶序列一般為19 － 21nt 長。百恩維生物亦可針對客戶的需求來設(shè)計，由客戶選擇靶位點(diǎn)數(shù)量。
對于每條選定的siRNA 靶序列，設(shè)計 siRNA 正義鏈和反義鏈，以 loop(9nt) 相連，稱為 shRNA（short hairpin RNA）。
3、百恩維生物提供陰性對照和陽性對照載體。
siRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建：合成模板、雙酶切siRNA空載體、連接與轉(zhuǎn)化、測序鑒定、質(zhì)粒制備及定量。
提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 質(zhì)粒、甘油菌、測序結(jié)果等。
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