1)從mRNA為模板直接進行cDNA雙鏈的合成,最大限度的保證了文庫的質(zhì)量。
2)保證文庫的片段長度和全長率.
3)可以達到1*10^7 CFU 以上的原始文庫庫容量,上海?粕锛夹g(shù)有限公司">
構(gòu)建的文庫具有以下優(yōu)勢:
1)從mRNA為模板直接進行cDNA雙鏈的合成,最大限度的保證了文庫的質(zhì)量。 2)保證文庫的片段長度和全長率. 3)可以達到1*10^7 CFU 以上的原始文庫庫容量
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酵母單雜交cDNA文庫構(gòu)(clonetech公司酵母篩選系統(tǒng))
1. 服務(wù)流程
1.1 樣品QC,Total RNA的提取以及mRNA的分離,cDNA雙鏈的合成。
1.2 對合成的cDNA雙鏈進行長度篩選。
1.3 將長度篩選的cDNA與載體進行連接反應(yīng),載體與pGADT7-Rec2進行連接,免費提供酵母篩選各個輔助質(zhì)粒和酵母菌株。
1.4 將連接產(chǎn)物電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞。
1.5 cDNA文庫的QC:檢測文庫庫容量;隨機挑取32個克隆子,PCR檢測平均插入片段大小,陽性率。
1.6 文庫質(zhì)粒提。ㄌ峁200ug以上的高質(zhì)量酵母文庫質(zhì)粒)
2.產(chǎn)品內(nèi)容
我們提供構(gòu)建好的酵母文庫的甘油菌液(含20%甘油的LB培養(yǎng)基),文庫甘油菌,隨機克隆子的PCR鑒定圖譜,文庫構(gòu)建報告,酵母雙雜交篩選相關(guān)細胞和質(zhì)粒。
3.質(zhì)量標準
3.1 文庫庫容量:大于1*10^7 CFU。
3.2 平均插入片段:大于1.2Kbp。
3.3 陽性率:大于95%。
4.服務(wù)時間
30個工作日內(nèi)
該服務(wù)可以選擇添加均一化處理過程,構(gòu)建出均一化酵母單雜交文庫,可以減少酵母篩選的工作量和篩選的效率。