細胞增殖檢測

細胞增殖檢測 　　細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖、遺傳的基礎，是細胞最基本的生理活動。 　　百恩維可提供MTT法以及CKK-8法細胞增殖檢測服務，檢測細胞存活和生長 。該法靈敏度高、經濟有效，且可應用于生物學和醫(yī)學等多種研究領域，例如判斷藥物、外源性基因、細胞因子等對于細胞的作用，明確上述因子對于細胞生物學行為的影響（如細胞活力、增殖、凋亡等方面），是目前檢測細胞增殖的主要方法。 　　　MTT法檢測原理 　　活細胞進行生命活動需要能量，而線粒體是能量轉換生成ATP的重要場所，線粒體內膜呼吸鏈上的重要的酶-琥珀酸脫氫酶（succinate dehydrogenase, SDH）可被視為線粒體的標志，因此細胞內琥珀酸脫氫酶的活力間接顯示了該細胞的活力。琥珀酸脫氫酶可使其底物脫氫，脫下的氫能將四甲基偶氮唑鹽（MTT）還原成藍紫色的甲臜（formazan）顆粒。甲臜顆粒被有機溶劑如二甲基亞砜溶解后呈現的顏色深淺可通過酶聯儀測出光密度值，通過光密度（OD）值可比較不同實驗組內細胞的相對存活率。在一定細胞數范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比，從而可以對細胞的活力、增殖與凋亡情況進行檢測。 　　　CCK-8法檢測原理 　　CCK-8法與MTT法檢測原理相似，細胞活性檢測試劑中含有WST-8，化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazan）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。用酶聯免疫檢測儀測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。 　　　 　　服務流程： 實驗方案設計與確認 細胞培養(yǎng)與接種 細胞處理與檢測 數據分析 實驗報告提交，包括實驗原始數據及分析結果 　　細胞樣本運輸說明： 　　如客戶提供細胞進行試驗，可選擇以下寄送方式 細胞樣本以干冰運輸； 細胞樣本直接寄送培養(yǎng)瓶（密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出）； 　　服務周期： 　　服務內容 　 　實驗周期 　　細胞培養(yǎng) 　 　1周 　　MTT法/CCK-8法測定細胞增殖 　　1～2周 　　實驗報告整理 　 　0.5周