單細(xì)胞凝膠電泳是一種快速檢測(cè)單細(xì)胞DNA損傷的實(shí)驗(yàn)方法,因其細(xì)胞電泳形狀頗似彗星,叉稱彗星試驗(yàn)( comet assay)
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概念及原理:
單細(xì)胞凝膠電泳是一種快速檢測(cè)單細(xì)胞DNA損傷的實(shí)驗(yàn)方法,因其細(xì)胞電泳形狀頗似彗星,叉稱彗星試驗(yàn)( comet assay)。該技術(shù)的原理是基于有核細(xì)胞的DNA分子量很大,DNA超螺旋結(jié)構(gòu)附著在核基質(zhì)中,用瓊脂糖凝膠將細(xì)胞包埋在載玻片上,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜及其他生物膜破壞,使細(xì)胞內(nèi)的RNA、蛋白質(zhì)及其他成分進(jìn)入凝膠,繼而擴(kuò)散到裂解液中,惟獨(dú)核DNA仍保持纏繞的環(huán)區(qū)附著在剩余的核骨架上,并留在原位。若細(xì)胞受損,在堿性電泳液( pH>13)中,先是DNA雙鏈解螺旋且堿變性為單鏈,單鏈斷裂的碎片分子量小即可進(jìn)入凝膠中,在電泳時(shí)斷鏈或碎片DNA向陽極遷移,形成拖尾。
科研及臨床應(yīng)用:
單細(xì)胞凝膠電泳是一種快速檢測(cè)單細(xì)胞DNA損傷的實(shí)驗(yàn)方法,目前已被廣泛應(yīng)用于體內(nèi)或者體外各種有核細(xì)胞經(jīng)受試物誘導(dǎo)的DNA損傷、修復(fù)、細(xì)胞凋亡、毒理學(xué)、腫瘤治療評(píng)價(jià)、放射生物學(xué)等方面的研究。
標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸:
若是在液氮中凍存細(xì)胞,凍存管立即置于干冰中運(yùn)輸;若是新鮮培養(yǎng)細(xì)胞,待細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶底部(培養(yǎng)48h),將細(xì)胞培養(yǎng)瓶加滿培養(yǎng)基,24h內(nèi)(18-37℃)運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)所需試劑和藥品請(qǐng)按照說明書保存條件運(yùn)輸。
客戶須知:
客戶需提供:
實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞系(1×106個(gè)細(xì)胞,可傳代),特殊細(xì)胞需提供培養(yǎng)基;
實(shí)驗(yàn)所需特殊或不常用試劑和藥品。
報(bào)告形式:
本公司提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告單,含主要實(shí)驗(yàn)步驟、單細(xì)胞凝膠電泳熒光圖片。