細(xì)胞增殖檢測

 概念和原理

 細(xì)胞增殖是生物體生長、芨育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)，是生物體的重要生命特征。細(xì)胞增殖指細(xì)胞在周期調(diào)控因子的作用下，通過DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成等復(fù)雜反應(yīng)后進(jìn)行分裂來完成。目前常用的有MTT比色法和CCK8法：

●   MTT(四甲基偶氮唑鹽)比色法：細(xì)胞線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍(lán)紫色的針狀甲攢( Formazan)結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜(DMSO)溶解。使用酶標(biāo)儀在490 nm波長處測量OD值，間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性，判斷細(xì)胞毒性、細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖能力。

●   CCK8法：CCK8試劑盒采用MTT的升級產(chǎn)品，基于WST-8（2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）在電子耦合劑存在的情況下，可被細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色甲攢( Formazan)產(chǎn)物。顏色的深淺與細(xì)胞增殖能力成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測量OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量及活性。

科研和臨床應(yīng)用

 細(xì)胞增殖檢測常用于檢測癌基因與抑癌基因的功能、檢測信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子功能、測定物質(zhì)毒性、評估藥物安全、檢測細(xì)胞增殖能力等。

客戶須知

 客戶可提烘相關(guān)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或處理完成的細(xì)胞。

     對于懸浮細(xì)胞，客戶可選擇采用MTT法或CCK8法。