基因功能高通量篩選服務(wù)
服務(wù)流程:
基因功能高通量篩選服務(wù)優(yōu)勢(shì)
Ø 高通量,可同時(shí)對(duì)多個(gè)候選基因的多種生物學(xué)功能加以分析,揭示其在疾病發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制
Ø 高度自動(dòng)化,人為影響因素小,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性高
吉?jiǎng)P基因支持高通量研究的前期工作:
- Genechem RNAi文庫(kù):為高通量篩選提供必要的陰性、陽(yáng)性對(duì)照系統(tǒng),確保高通量篩選實(shí)驗(yàn)的可行性、可靠性;
- RNAi慢病毒載體:經(jīng)過(guò)優(yōu)化的RNAi慢病毒載體,在確保對(duì)細(xì)胞具有高感染效率的同時(shí)兼顧高細(xì)胞活力。是獲得準(zhǔn)確HCS結(jié)果的又一必要條件。
- Genechem細(xì)胞庫(kù):長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)證明:不同來(lái)源,同樣名稱的細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞的感染效率,以及細(xì)胞對(duì)基因操作的敏感性是不同的。吉?jiǎng)P基因細(xì)胞庫(kù)現(xiàn)由300多株經(jīng)過(guò)馴化的細(xì)胞株組成。我們清楚吉?jiǎng)P細(xì)胞庫(kù)中每一株細(xì)胞的習(xí)性、病毒感染效率,為開展HCS工作提供了必要并且堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
- HCS硬件設(shè)備:通過(guò)半年比較,篩選出最適合腫瘤生物特性基因功能研究的儀器,最大限度滿足優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的需要。
基因功能高通量篩選服務(wù)應(yīng)用領(lǐng)域
A. 細(xì)胞增殖
95D細(xì)胞 同一視野連續(xù)5天拍照計(jì)數(shù),通過(guò)圖像分析,自動(dòng)計(jì)算出每次拍攝到的細(xì)胞數(shù),做出增值曲線
優(yōu)勢(shì):連續(xù)追蹤同一培養(yǎng)孔的細(xì)胞生長(zhǎng),且針對(duì)表達(dá)熒光的基因敲減陽(yáng)性細(xì)胞
B. 細(xì)胞周期
PI染色顯示細(xì)胞核,拍照后分析圖像的曝光強(qiáng)度,計(jì)算每個(gè)細(xì)胞核的熒光強(qiáng)度值,間接反映細(xì)胞核DNA含量,做出峰型分布圖,計(jì)算出對(duì)應(yīng)細(xì)胞周期的細(xì)胞數(shù)和百分比
優(yōu)勢(shì) :無(wú)需處理細(xì)胞,染色原位完成,僅需少量細(xì)胞
C. 細(xì)胞運(yùn)動(dòng)
通過(guò)細(xì)胞對(duì)熒光beads的吞噬,反映出特定時(shí)間段內(nèi)腫瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)的路徑,來(lái)表示細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的強(qiáng)弱
D. 血管新生
Matrigel tube formation實(shí)驗(yàn)顯示了腫瘤細(xì)胞分泌因子對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞成血管能力的影響,通過(guò)自動(dòng)分析血管密度,血管長(zhǎng)度,血管節(jié)點(diǎn)數(shù)目來(lái)反映成血管能力的強(qiáng)弱。
E. 克隆形成分析
對(duì)聚集細(xì)胞的位置分析,找出克隆。自動(dòng)計(jì)算出克隆數(shù)目和克隆內(nèi)的細(xì)胞數(shù)以及克隆的形態(tài)參數(shù),反映細(xì)胞克隆形成能力的特征
上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司
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