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qPCR細胞內源表達檢測預實驗
qPCR基因表達檢測預實驗用于檢測目的細胞中目的基因mRNA水平的表達豐度，以確認RNA干擾正式實驗的可行性和實驗參數(shù)。
服務類別：分子與細胞總訪問：1259
最后更新：2020-11-6半年訪問：19
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qPCR 細胞內源表達檢測預實驗

 


qPCR 基因表達檢測預實驗用于檢測目的細胞中目的基因mRNA水平的表達豐度，以確認RNA干擾正式實驗的可行性和實驗參數(shù)，如果目的細胞中目的基因的表達豐度低甚至不表達，則該細胞不適用于后續(xù)RNAi的細胞學實驗。

服務優(yōu)勢

 

服務流程


 

服務說明


 

Real-time PCR 預實驗范例 
 收集生長狀態(tài)良好的目的細胞（A和B細胞），提取RNA并反轉錄得到cDNA，并以該cDNA為模板，用針對目的基因以及內參基因設計合成的Real-time PCR引物進行擴增（采用Biorad IQ5 Real-time PCR儀，Sybr Green法完成實驗），以檢測細胞中目的基因mRNA水平的表達。
 檢測結果如下（A細胞為黑色曲線，B細胞為紅色曲線）：

 
熔解曲線和電泳圖顯示引物擴增特異性良好。Ct值原始數(shù)據(jù)顯示A、B細胞actin表達豐度基本一致，B細胞目的基因表達豐度低，A細胞目的基因表達豐度相對更高，所以A細胞更適合作為靶細胞進行后續(xù)RNAi實驗。 
 

Ø   相關服務 ： 
基因表達檢測（ qPCR） 
 

相關產品： 
常用細胞株 
經過實驗驗證的qPCR引物 
 

 


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