通過液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)方法檢測(cè)生物體受擾動(dòng)或刺激前后大量代謝產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)變化,進(jìn)而闡明生物體代謝相關(guān)過程的代謝組學(xué)技術(shù)。
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產(chǎn)品定義
通過液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)方法檢測(cè)生物體受擾動(dòng)或刺激前后大量代謝產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)變化,進(jìn)而闡明生物體代謝相關(guān)過程的代謝組學(xué)技術(shù)。其研究對(duì)象主要是相對(duì)分子質(zhì)量1000以下的內(nèi)源性小分子代謝物。
技術(shù)原理
液相色譜可以分離無揮發(fā)性和未衍生化的代謝物,因此LC-MS可以分析的化合物種類范圍比GC-MC廣。LC-MS最適合作為未知代謝物研究中的探索方法,或者在多種目標(biāo)代謝物由于揮發(fā)性問題不能用GC-MS進(jìn)行分析時(shí)采用。
實(shí)驗(yàn)流程
使用儀器
AB Sciex TripleTOFTM 5600
液相色譜柱
◆ C18反相柱 ◆ HILIC親水柱
質(zhì)譜分析模式
◆ 正離子模式 ◆ 負(fù)離子模式
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
◆ 相對(duì)于NMR,重復(fù)性和靈敏度更高
◆ 相比于GC-MS,分析范圍更廣
應(yīng)用領(lǐng)域
◆ 表型和生理功能研究 ◆ 疾病病理研究 ◆ 臨床診斷及治療
◆ 藥物研究 ◆ 中醫(yī)理論研究 ◆ 食品科學(xué)與營養(yǎng)學(xué)研究
樣品要求
樣品類型 |
樣本量 |
保存方式 |
組織 |
100 mg |
液氮或-80度保存 |
尿液 |
>300 μl |
-80℃保存半年到一年以內(nèi),不能添加疊氮鈉 |
血液、腦脊液、透析液等 |
>300 μl |
★ 樣本設(shè)置生物學(xué)重復(fù)時(shí),通常需要每組重復(fù)樣本數(shù)量動(dòng)物樣本n>=10,臨床樣本n>=30,所有重復(fù)樣本獨(dú)立分析。
技術(shù)參考案例
[1] Hahm ER, Lee J, et al. Metabolic alterations in mammary cancer prevention by withaferin A in a clinically relevant mouse model. J Natl Cancer Inst. 2013; 105(15): 1111-22.
[2] Nørskov NP, Hedemann MS, et al. Multicompartmental nontargeted LC-MS metabolomics: explorative study on the metabolic responses of rye fiber versus refined wheat fiber intake in plasma and urine of hypercholesterolemic pigs. JProteome Res. 2013; 12(6): 2818-32.
[3] Huang Q, Tan Y, et al. Metabolic characterization of hepatocellular carcinoma using nontargeted tissue metabolomics. Cancer Res. 2013; 73(16): 4992-5002.