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蛋白質(zhì)組label-free
蛋白質(zhì)組label-free
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問:1843
最后更新:2024-6-24半年訪問:36
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                                    label-free案例

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一、樣品處理
1、8個(gè)樣品凍干,加入TFA水溶液從溶。
2、取8個(gè)C18脫鹽柱分別加入100%乙jing離心。再加入TFA 離心。
3、8個(gè)C18脫鹽柱分別加入從溶的樣品,離心1min反復(fù)上樣3次。
4、分別加入洗脫液離心1min,并收集離心后的洗脫液凍干。
5、將凍干后樣品加入A液從溶后離心2min,取上清定量。
6、分別取相同的量進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)

二、肽圖質(zhì)譜檢測(cè)
檢測(cè)條件
液相:EASY-nLC1200
色譜條件:色譜柱:Dionex C18 PePMap300, 1.9um, 120Å; ID 150um, length 12cm。
流速:略
洗脫條件:

time 0 8 24 60 79 80         85         86        90
%B 5 5 13 28 40 95         95         6           6


質(zhì)譜儀:QE
質(zhì)譜條件:數(shù)據(jù)采集時(shí)間:78min, 噴霧電壓 (spray voltage):2.0KV; 毛細(xì)管溫度(caplillary temperature):320℃; 碰撞能量(normalized collision energy):27%, 采集質(zhì)量范圍:300-1400 Da。


CK_TIC



CK__BPC


單個(gè)樣品重復(fù)3次

比較組間有統(tǒng)計(jì)意義的差異蛋白。

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