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利用Cas9/gRNA技術(shù)，構(gòu)建針對需要敲除的基因的gRNA序列，通過電轉(zhuǎn)或者慢病毒介導(dǎo)的方式，使得細(xì)胞在特定基因上造成不同剪輯缺失的情況。
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細(xì)胞的基因敲除說明：
利用Cas9/gRNA技術(shù)，構(gòu)建針對需要敲除的基因的gRNA序列，通過電轉(zhuǎn)或者慢病毒介導(dǎo)的方式，使得細(xì)胞在特定基因上造成不同剪輯缺失的情況。藥物篩選后，獲得單細(xì)胞克隆，抽提DNA，PCR產(chǎn)物TA克隆，每個細(xì)胞系送3-5個克隆測序分析，提供單拷貝和雙拷貝敲除的細(xì)胞系至少各2株。適用范圍：人或小鼠等細(xì)胞系，并且該基因雙拷貝敲除后不會導(dǎo)致細(xì)胞致死的情況。否則，只能提供單拷貝敲除的細(xì)胞系。實(shí)驗(yàn)周期：約3-6個月.
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