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數(shù)字PCR平臺
基于泊松分布原理建立的一種核酸分子絕對定量技術。
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最后更新:2024-8-6半年訪問:63
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基于泊松分布原理建立的一種核酸分子絕對定量技術。通過微滴發(fā)生器形成上萬個微滴,其中每個微滴或不含或含有一個至數(shù)個核酸靶標分子。每個單分子進行PCR擴增,探針用于檢測特定序列的靶標。隨后逐個對每個微滴檢測有無熒光信號,最終根據(jù)陽性微滴的比例,按照泊松分布的原理,通過軟件計算出待檢靶分子的拷貝數(shù)。


儀器:

微滴式數(shù)字PCR - BIORAD QX200,可對DNARNA分子進行絕對定量分析,適用于 EvaGreen 或探針的數(shù)字PCR。


主要用途:

•    基因表達:可對細微變化進行檢測,準確性高,重復性佳。

•    突變檢測:可檢測低含量的突變基因,突變序列檢測靈敏度高。

•    拷貝數(shù)變異CNV檢測:可通過精確計量目的基因與參考基因,計算比值得到目的基因的拷貝數(shù)。

•    二代測序數(shù)據(jù)驗證:可直接對二代測序數(shù)據(jù)結果進行絕對定量分析。
 


應用領域:

•    臨床應用,腫瘤標志物的檢測、腫瘤靶向用藥和拷貝數(shù)變異分析等

•    環(huán)境監(jiān)控,病原微生物的檢測、水樣本中微生物的檢測等

•    食品檢測,轉基因動物的檢測、轉基因植物的檢測



主要特點:

•    便捷的測定設計,不需要標準曲線

•    可通過增加PCR反應的數(shù)量提高精確度

•    可高度耐受PCR反應抑制劑

•    可精確鑒定目標拷貝數(shù),分析微小差異

•    簡便而易用的工作流程,一次可以檢測 96 個樣品

•    靈活的數(shù)字 PCR 化學方法,已針對 TaqMan 水解探針和 EvaGreen 測定進行優(yōu)化




 
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