細(xì)胞染色體核型分析介紹
染色體核型(Karyotype)是指生物體細(xì)胞有絲分裂中期染色體組的表型,是染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和。核型分析就是經(jīng)秋水仙素處理抑制細(xì)胞分裂之后,細(xì)胞分裂停止在分裂中期,當(dāng)獲得足夠量的分裂期細(xì)胞后,經(jīng)低滲、固定、制片、染色后做鏡下觀察,按照染色體的數(shù)目、大小、著絲粒位置、臂比等形態(tài)特征,對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的染色體進(jìn)行配對(duì)、分組、歸類、編號(hào)等分析,最終得到核型圖,即將全部染色體逐條按其長短、形態(tài)、類型特征按照規(guī)律進(jìn)行排列的染色體組模式圖。
進(jìn)行染色體核型分析,可以得到染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異信息,是鑒別染色體的重要依據(jù),為相關(guān)科研提供高質(zhì)量的數(shù)據(jù)結(jié)果。
核宇生物采用550條帶分辨率對(duì)人細(xì)胞染色體核型進(jìn)行吉姆薩(Giemsa)染色G顯帶分析。
技術(shù)原理
在經(jīng)物理和化學(xué)步驟處理后,用特殊染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,使染色體上出現(xiàn)明暗相間或深淺不同條帶的技術(shù),稱為染色體顯帶技術(shù)(banding technique)。染色體條帶的數(shù)目、位置、寬窄和著色深淺均具有相對(duì)穩(wěn)定性,因此每條染色體都有固定的分帶模式,即染色體帶型。
目前染色體核型分析技術(shù)可分為兩大類,一類是整條染色體顯帶,如:G、Q和R帶。一類是染色體局部顯帶,使少數(shù)特定的染色體區(qū)域顯帶,如C、T和N帶。
G帶,即吉姆薩帶,是將處于分裂中期的細(xì)胞經(jīng)一系列處理后,再經(jīng)吉姆薩染料染色后所呈現(xiàn)的條帶,是目前被廣泛應(yīng)用的一種顯帶技術(shù),顯帶方法簡單,帶型穩(wěn)定,保存時(shí)間長。
實(shí)驗(yàn)過程:
1、對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞,添加0.05mg/ml秋水仙素處理6h。
2、胰酶消化,收集細(xì)胞。
3、37℃水浴預(yù)熱0.075M KCl。
4、低滲:加5mL0.075M KCl,吹打均勻,37℃水浴低滲處理30min。
5、預(yù)固定:加入1mL固定液,吹打均勻,立即1000 rpm離心5 min。
6、固定:去上清,加入5mL固定液,吹打均勻,固定30min,1000 rpm離心5 min。重復(fù)2次。
7、去上清,加入0.5-1mL固定液,打勻,以高度為20-30cm滴片,過酒精燈火焰5s。
8、玻片吉姆薩染液染色10 min,流水沖洗,封片,油鏡下觀察拍照分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
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項(xiàng)目交付
1、提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告書,包括實(shí)驗(yàn)材料、試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)過程方法、結(jié)果及分析。
2、原始數(shù)據(jù)、圖片,以及文本電子版。
3、周期:2-3周。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗(yàn)材料和儀器,滿足項(xiàng)目課題實(shí)驗(yàn)需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿意。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實(shí)驗(yàn),按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題,提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。
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