銅綠假單胞菌的培養(yǎng)特性與臨床應用！

                                         銅綠假單胞菌的培養(yǎng)特性與臨床應用！
 

一、概述
銅綠假單胞菌俗稱綠膿桿菌，廣泛存在于自然界、人體皮膚、腸道和呼吸道中。為條件致病菌，當機體免疫力低下時，可引起繼發(fā)感染和混合感染。
本菌為革蘭染色陰性小桿菌，無芽孢，無莢膜，有菌毛，菌體一端有叢鞭毛。需氧。普通培養(yǎng)基上生長良好，能產生水溶性藍綠色綠膿素和綠色的熒光素，并擴散至培養(yǎng)基。抵抗力強，對多種抗生素易產生耐藥性。綠膿桿菌的致病物質主要是內毒素、外毒素、蛋白分解酶等。其致病特點為引起繼發(fā)感染，多發(fā)生在機體免疫力降低時，如大面積燒傷，長期使用免疫抑制劑等。臨床常見皮膚和皮下組織感染、中耳炎、腦膜炎、尿路感染、敗血癥等。在外科創(chuàng)傷感染中，本菌檢出率最高，因此，必須嚴格消毒及無菌操作，防止醫(yī)源性交叉感染。本菌對多種抗生素具有天然抗藥性，治療可選用多黏菌素B、慶大霉素等。
 
二、培養(yǎng)特性
銅綠假單胞菌為專性需氧菌，部分菌株能兼性厭氧生長，在普通培養(yǎng)基上生長良好，在含氮鹽、葡萄糖等簡單合成培養(yǎng)基和S—S瓊脂等選擇性培養(yǎng)基上都能發(fā)育。在普通瓊脂平板上，菌落大小不一，呈圓形、邊緣不整齊、扁平隆起、光滑濕潤，常互相融合。黏液型菌落較大，邊緣透明，中央稍濁。瓊脂被水溶性色素染成藍綠或黃綠色。在血瓊脂培養(yǎng)基上菌落呈毛玻璃樣、扁平狀，菌落四周可產生溶血環(huán)。多數菌株分泌綠膿色素和熒光色素(fluorescin)，呈藍綠或黃綠色，有4％的菌株不產生色素。
 
三、抵抗力和致病性
綠膿桿菌成為院內呼吸道感染的重要原因是因為綠膿桿菌有較低的營養(yǎng)要求，對各種環(huán)境有較好的耐受性和適應能力，容易在各種條件下繁殖生長。它住醫(yī)院環(huán)境中分布廣泛．人的皮膚、手上、被褥、家具、門窗、吸氧管及霧化吸入器等常存在綠膿桿菌，醫(yī)院內的患者及工作人員帶菌率也較高，有的部位達50％，但正常人極少發(fā)生綠膿桿菌感染。
銅綠假單胞菌的許多細胞和細胞外產物具有毒力，主要有：
①菌毛：屬銅綠假單胞菌的菌體物質，是非黏液型銅綠假單胞菌附著呼吸道上皮細胞的黏附素。
②黏液外多糖：銅綠假單胞菌表面的糖脂蛋白，為黏液型銅綠假單胞菌的黏附素，有類似熒膜保護細菌的作用，并能直接抑制巨噬細胞吞噬作用，抑制補體結合和中性粒細胞趨化，阻止淋巴細胞轉化，降低呼吸暴發(fā)和殺菌力。
③內毒素：毒力低，推測可能與銅綠假甲，胞菌敗血癥的血管阻力降低和早期低血壓有關。
④蛋白酶類：彈性蛋白酶、膠原蛋白酶、纖維蛋白酶等可直接或間接破壞組織細胞，降解免疫球蛋白，滅活補體，抑制單核巨噬細胞趨化，可致肺泡內出血、肺泡隔損傷和破壞。
⑤外毒素：外毒素A是銅綠假甲胞菌最強的毒力因子，較內毒素毒力大數萬倍，干擾mRNA的多肽轉位，抑制蛋白質合成，對巨噬細胞具有明顯毒性，可致肺出血、肝腎壞死和白細胞減少、休克。外酶S可增加肺泡屏障的蛋白質雙向通透性。
⑥溶血素：包括熱穩(wěn)定的糖脂和不耐熱的磷酸脂酶c。前者能誘導白細胞，肥大細胞及血小板釋放介質，增強磷酸脂酶C活力。后者能破壞肺泡表面活性物質中的卵磷脂(磷脂酰膽堿)，致肺泡表面張力F降，肺泡萎陷不張。
⑦綠膿素：能抑制細胞呼吸、降低肺泡巨噬細胞的殺菌作用，抑制淋巴細胞增殖，損害纖毛運動，可抑制其他細菌生長。銅綠假單胞菌自身對綠膿素不敏感，從而有利于銅綠假單胞菌的自身繁殖。
 
四、藥物敏感結果
從表可以看出比較敏感藥物亞胺培南75.4 %, 阿米卡星74.2%, 頭孢哌酮/舒巴坦72 .4%, 環(huán)丙沙星70.4 %, 頭孢他啶69.2%。耐藥最嚴重的是派拉西林56 .9%, 頭孢曲松61 .7%,頭孢噻肟75 %, 羧芐西林100 %, 氨芐西林100 %。
 
五、銅綠假單胞桿菌肺炎
銅綠假單胞桿菌，即通常所稱綠膿桿菌，引起的急性化膿性肺部感染，稱為銅綠假單胞桿菌肺炎或綠膿桿菌性肺炎。綠膿桿菌性肺炎約占醫(yī)院內獲得性肺炎的18％～30％。銅綠假單胞桿菌是一種條件致病菌，好發(fā)生于慢性支氣管炎、肺氣腫、糖尿病、腎盂腎炎及慢性消耗性疾病的患者，其發(fā)病率不斷上升，治療難度大，病死率高，也是目前臨床治療大難題和關注的焦點。
 
（一）臨床表現：
1、癥狀
患者多為老年人、免疫功能障礙的住院患者。一般經呼吸道感染者，起病慢；經血液感染者起病急。感染中毒癥狀明顯，體溫升高、可有寒戰(zhàn)，熱型呈弛張熱或不規(guī)則熱，有時體溫高峰在清晨，多有咳嗽、咯痰，可為黃綠色膿液，有時痰中帶血，可有呼吸困難。
2、體征
體檢除有熱病容、呼吸困難、發(fā)紺等表現外，肺部可有實變體征、局部叩診濁音、語顫增強、管狀呼吸音，可有濕啰音。
3、血白細胞的改變，可增高或不增高，多有中性粒細胞增多及核左移
4、胸部x線多表現為
雙肺下方散在小片狀陰影，呈支氣管肺炎改變，可互相融合成大片陰影，其問可見小的膿腫形成，有的可出現胸腔積液。
 
（二）診斷：
①住院患者有慢性呼吸道疾病、長期應用多種抗生素及抗癌藥物者，這些患者一旦出現高熱、寒戰(zhàn)、咯膿痰就要想到綠膿桿菌感染性肺炎。
②對免疫功能低下的患者行支氣管鏡檢奩及氣管插管、氣管切開或進行霧化吸入，如出現中毒癥狀(高熱、寒戰(zhàn))、咳痰，特別是咯綠色膿痰，相對緩脈，就要考慮綠膿桿菌感染。結合胸片示兩肺散在斑片狀陰影等征象，進一步做痰培養(yǎng)多次檢鑊出綠膿桿菌，且為純培養(yǎng)(特別是用防污染標本刷取自下呼吸道的分泌物中培養(yǎng)出綠膿桿菌)，則可確診綠膿桿菌性肺炎。如血、胸水中培養(yǎng)出綠膿桿菌，可能確診為綠膿桿菌性肺炎。
1、一般治療
而且要加強支持療法，尤其是對危重患者，要靜脈輸注新鮮血漿、白蛋白或脂肪乳等。中藥治療，銀花30g、連翹20g、蒲公英20g、地丁15g、黨參20g、百部20g，白芨20g、桔梗lOg、貝母15g、當歸20g、半復10g、甘草5g，水煎服，每日1劑，連服6劑，根據情況調整。
2、抗感染治療
選擇敏感有效抗生素是本病治療的重點，一般有效抗生素有3類。
①β-內酰胺類：如頭孢他定(復達欣)、氧哌嗪青霉素、哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦及氨曲南、亞胺培南西司他丁等。
②氨些糖苷類抗生素：如丁胺卡那霉素和妥布霉素。
③氟喹諾酮類：如環(huán)丙沙星、左氧氟沙旱、莫西沙星。
 
（三）預防：
綠膿桿菌性肺炎多為院內感染。加強醫(yī)院內消毒隔離、切斷交叉感染途徑是預防本病的中心。特別是要注意人工呼吸器械：如霧化及濕化裝置、吸痰器具和給氧面罩、導管的定期消毒。昏迷患者應注意口腔護理，減少和防止分泌物吸入。重癥監(jiān)護病房醫(yī)護人員應堅持戴口罩，接觸患者或治療操作前后應洗手消毒。綠膿桿菌感染患者的病房應加強通風，并定期進行紫外線照射或空氣消毒，出院后應徹底行終末消毒。合理使用廣譜抗生素，嚴格掌握皮質激素等免疫抑制劑的應用指征。如病區(qū)內屢有本病發(fā)生，應在病區(qū)內進行流行病學調夯，查清感染來源(如帶菌工作人員或污染器械和管道)，并加以切斷。

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