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基因克隆是指分離制備合格的待操作的DNA,包括作為運(yùn)載體的DNA和欲克隆的目的DNA。
基因突變是指由于DNA堿基對的置換、增添或缺失而引起的基因結(jié)構(gòu)的變化,亦稱點(diǎn)突變。
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基因克隆與定點(diǎn)突變技術(shù)服務(wù)
基因克隆(gene cloning)
基因克隆是70年代發(fā)展起來的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù),可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。"分"是指分離制備合格的待操作的DNA,包括作為運(yùn)載體的DNA和欲克隆的目的DNA;"切"是指用序列特異的限制性內(nèi)切酶切開載體DNA,或者切出目的基因;"連"是指用DNA連接酶將目的DNA同載體DNA連接起來,形成重組的DNA分子;"轉(zhuǎn)"是指通過特殊的方法將重組的DNA分子送入宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和擴(kuò)增;"選"則是從宿主群體中挑選出攜帶有重組DNA分子的個體�；蚬こ碳夹g(shù)的兩個最基本的特點(diǎn)是分子水平上的操作和細(xì)胞水平上的表達(dá),而分子水平上的操作即是體外重組的過程,實(shí)際上是利用工具酶對DNA分子進(jìn)行"外科手術(shù)"。一般來說,基因克隆技術(shù)包括把來自不同生物的基因同有自主復(fù)制能力的載體DNA在體外人工連接,構(gòu)建成新的重組DNA,然后送入受體生物中去表達(dá),從而產(chǎn)生遺傳物質(zhì)和狀態(tài)的轉(zhuǎn)移和重新組合。因此基因克隆技術(shù)又稱為分子克隆、基因的無性繁殖、基因操作、重組DNA技術(shù)以及基因工程。
基因定點(diǎn)突變
基因突變是指由于DNA堿基對的置換、增添或缺失而引起的基因結(jié)構(gòu)的變化,亦稱點(diǎn)突變。在自然條件下發(fā)生的突變叫自發(fā)突變,由人工利用物理因素或化學(xué)藥劑誘發(fā)的突變叫誘發(fā)突變�；蛲蛔兪巧镒儺惖闹饕�,是生物進(jìn)化的主要因素。在生產(chǎn)上人工誘變是產(chǎn)生生物新品種的重要方法。根據(jù)基因結(jié)構(gòu)的改變方式,基因突變可分為堿基置換突變和移碼突變兩種類型。
服務(wù)要求
1)請您通過EMAIL提供需要進(jìn)行突變基因和克隆基因的全部詳細(xì)序列;
突變前序列請標(biāo)注為:wild sequence
突變后序列請標(biāo)注為:mut sequence
2)請?zhí)峁┩蛔兒涂寺』虻脑敿?xì)背景資料;
如:突變前的測序結(jié)果,使用何種限制酶切位點(diǎn),克隆于何種載體。
3)說明實(shí)驗(yàn)的具體要求。
4)簽定必要的技術(shù)保密合同。
操作程序
1)我們將首先對測序結(jié)果進(jìn)行分析,然后設(shè)計突變方案。
2)根據(jù)突變方案設(shè)計合成突變引物,進(jìn)行基因突變實(shí)驗(yàn)的PCR反應(yīng),克隆變異體。
3) 進(jìn)行DNA測序驗(yàn)證突變序列的正確性。
4) 提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果,包括實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程,突變用引物,質(zhì)料變異體以及含有該質(zhì)料的菌種,測序結(jié)果等。
歡迎詳詢熱線 19931682702
