Pull down實(shí)驗(yàn)

根據(jù)研究對象的不同，可以分為：DNA pull down、RNA pull down、GST pull down。

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最后更新：	2021-8-4	半年訪問：	44
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服務(wù)商：上海昆盟生物科技有限公司

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服務(wù)介紹
公司簡介

DNA pull-down是體外研究DNA與蛋白互作的有力工具。該技術(shù)將生物素標(biāo)記的DNA片段結(jié)合在鏈霉親和素磁珠上，再與細(xì)胞核蛋白孵育，純化出與DNA片段互作的蛋白，洗滌洗脫得到的蛋白產(chǎn)物，做Western-blot檢測特定蛋白是否與靶DNA片段結(jié)合;做質(zhì)譜鑒定即可篩選出與DNA片段可能互作的蛋白信息(如：轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白等)。
RNA pull down是體外研究RNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)是用生物素標(biāo)記體外轉(zhuǎn)錄的靶RNA分子，再用鏈霉親和素純化出與靶RNA結(jié)合的蛋白復(fù)合體，洗脫得到RNA結(jié)合蛋白質(zhì)。再通過western blot實(shí)驗(yàn)檢測特定的RNA結(jié)合蛋白是否與靶RNA結(jié)合；或通過質(zhì)譜儀檢測可以篩選出與靶RNA結(jié)合的蛋白。
GST pull-down技術(shù)是一種體外驗(yàn)證或篩選互作蛋白的技術(shù)。該技術(shù)將"誘餌"蛋白與一種易于純化的配體標(biāo)簽（如：GST標(biāo)簽）進(jìn)行融合表達(dá)，而帶標(biāo)簽的誘餌蛋白能被特異結(jié)合該標(biāo)簽的固相親和配基捕獲，形成"次級(jí)親和支持物"，用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。純化產(chǎn)物洗脫后，經(jīng)Western blot驗(yàn)證或LC-MS/MS，即鑒定與誘餌蛋白互作的蛋白。
GST pull-down。

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