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破骨細胞活性測定及破骨細胞分化測定
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芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的體外破骨細胞檢測（OCL檢測）提供了一種確定抗骨吸收化合物對人破骨細胞分化或活性影響的獨特方法。在OCL檢測中，人類骨髓源性破骨前體細胞在含有M-CSF和RANKL的96孔板牛骨切片上培養(yǎng)7天，讓它們分化為成熟的骨吸收破骨細胞。
在培養(yǎng)初期，通過向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對破骨細胞分化的影響。該培養(yǎng)在第7天結(jié)束，分泌的抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）（破骨細胞數(shù)量的標志物）可用BoneTRAP試劑盒來對培養(yǎng)液進行測定。（英國IDS 公司）
在破骨細胞分化后的第7天，通過向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對破骨細胞活性的影響。第7天時更換培養(yǎng)液，TRACP 5b從第7天的培養(yǎng)液中測定，以此確定在添加化合物前破骨細胞的數(shù)量。繼續(xù)培養(yǎng)3天，使成熟的破骨細胞進行骨的再吸收。在第10天，I型膠原C末端肽（CTX），骨膠原降解和重吸收量的標志物，使用I型膠原C末端肽培養(yǎng)法（英國IDS 公司）對培養(yǎng)液進行測定。最后，一個表征破骨細胞平均活性的重吸收指標可以通過用破骨細胞的數(shù)量（第7天的TRACP 5b）除吸收獲得量（第10天的CTX）計算得出。如果有需要，我們的破骨細胞活性測試同樣能采用大鼠破骨細胞完成。
本公司提供兩種標準項目類型的OCL檢測，初步項目和擴展項目。初步項目為快速檢測大量化合物而設(shè)計的，每種化合物在2種不同濃度下重復(fù)檢測6次。本公司推薦使用初步項目的結(jié)果遴選合適的化合物進行擴展項目的深入檢測。擴展項目每種化合物在7種不同濃度下重復(fù)檢測8次，可得到化合物IC50值的可靠計算。細胞毒性檢測是為確定在檢測中所觀察到的抑制功效不是由破骨細胞化合物的細胞毒素功效所致。
每一個96孔板包括與所有實驗組的結(jié)果進行對照、加有賦形劑的基準組，和檢測系統(tǒng)中體現(xiàn)期望功效的參照化合物的質(zhì)控組。在破骨細胞分化檢測中，參考化合物是護骨素，破骨細胞分化的抑制劑。在破骨細胞活性檢測中，參照化合物是E64，半胱氨酸蛋白酶和破骨細胞活性的抑制劑。如果質(zhì)控組的結(jié)果與基準組的結(jié)果沒有太大的區(qū)別，本公司將重復(fù)檢測而不收取客戶額外費用。
情況說明書
芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的OCL檢測是確定抗骨吸收化合物對人破骨細胞影響的獨特設(shè)計。我們提供OCL的以下標準項目類型：
初步項目：在2種不同濃度條件下重復(fù)檢測6次
擴展項目：在7種不同濃度條件下重復(fù)檢測8次
本公司所有的工作都遵從質(zhì)量保證體系和標準操作流程（S.O.P）完成。在開展新項目前，本公司將和客戶一起準備詳細的研究方案，并且本公司的研究主任將確保該項目按研究方案所擬定的內(nèi)容精確完成。
典型周轉(zhuǎn)周期：
初步項目： 可達50種化合物/2月
擴展項目： 可達10種化合物/2月
在實驗過程中，如系本產(chǎn)品本身質(zhì)量問題，請在十五天內(nèi)提出，并完整地填寫質(zhì)量投訴表及完整的實驗報告等有關(guān)內(nèi)容，以書面的形式發(fā)給公司，一經(jīng)證實，免費調(diào)換。
