分子量表征—高分辨分子量檢測

分子量測定是蛋白質(zhì)樣品質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)。使用高分辨質(zhì)譜分析電噴霧得到的多電荷信號，利用 PEAKS ID 對信號進行去卷積分析，可獲得精確分子量數(shù)值。

1.采用Orbitrap Eclipse 質(zhì)譜儀，可提供超高分辨率、高靈敏度和高質(zhì)量精度的檢測；
2.使用PEAKS ID 軟件對信號進行去卷積分析及對蛋白質(zhì)翻譯后修飾自動注釋（如糖基化、N端焦谷氨酸環(huán)化、C端賴氨酸丟失等），獲得高質(zhì)量的精確分子量。

1.測定大分子蛋白質(zhì)樣品（約10-150KD）的完整精確分子量，可以測定抗體類藥物完整分子量、還原分子量、完整脫糖分子量、還原脫糖分子量、亞結(jié)構(gòu)片段分子量；
2.可以初步分析蛋白質(zhì)的修飾狀態(tài)（比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情況等），并進行相對定量分析

如下圖所示，將標(biāo)準(zhǔn)品 Intact mAb Mass Check Standard 進行還原切糖和只還原不切糖的處理后，通過 PEAKS ID 軟件可以得到蛋白標(biāo)準(zhǔn)品輕重鏈的精確分子量。

圖 | Intact mAb Mass Check Standard 還原切糖處理后，通過PEAKS ID 軟件解析輕重鏈的精確分子量

圖 | Intact mAb Mass Check Standard 還原處理后，通過PEAKS ID 軟件解析的重鏈精確分子量