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Dr.Cell實驗室采用超速離心方法從細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液、腦脊液以及其他體液（腹水、羊水、乳液以及唾液等）中的提取外泌體，獲取的高純度外泌體顆粒，可進行后續(xù)的NTA、TEM、WB等分析。
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| 外泌體抽提 |
| Dr.Cell實驗室采用超速離心方法從細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液、腦脊液以及其他體液（腹水、羊水、乳液以及唾液等）中的提取外泌體，獲取的高純度外泌體顆粒，可進行后續(xù)的NTA、TEM、WB等分析。 |
| 樣本準備 |
| 1、細胞上清 Cell culture supernatant |
| 細胞培養(yǎng)基必須使用去除 exosome的血清（如去外泌體胎牛血清,Exosome depleted Fetal Bovine Serum, VivaCell P/N: C38010050 ）或者無血清培養(yǎng)基，以降低背景值的干擾（牛血清中含有大量牛源外泌體）。 1)細胞在正常含有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定時間，細胞增長至約70%； 2)對于貼壁細胞，去除原有培養(yǎng)基，用PBS洗滌，更換新的含去外泌體血清的培養(yǎng)基或者無血清培養(yǎng)基；對于懸浮細胞，300×g，4℃，10分鐘收集細胞，用PBS洗滌，使用不含外泌體的培養(yǎng)基或者無血清培養(yǎng)基懸浮細胞并繼續(xù)培養(yǎng)； 3)細胞繼續(xù)培養(yǎng)24-48小時，根據(jù)細胞的生長速度確定收取上清時間； 4)收集細胞上清，300×g，4℃，離心10分鐘；小心吸取上清，注意避免吸入細胞或者細胞碎片； 5)上清0.22µm過濾，去除細胞碎片、凋亡小體和微囊泡； 6)將上清樣本凍存于-80℃。 |
| 建議送樣量：20ml以上 |
| 2、血漿 Plasma |
| 1)取全血至EDTA抗凝管中，輕柔混勻； 2)4°C條件下，2500×g，離心15min，取上清； 3)再次2500×g，離心15min，取上清即為血漿； 4)血漿于-80°C保存。 |
| 建議送樣量：2ml以上 |
| 3、建議送樣量：2ml以上 |
| 1)將4ml全血置于普通采血管中（注意收集血清樣本不要加入抗凝劑）37℃凝固20-30 min； 2)2000×g離心10 min，取上清，淡黃色透明液體即為血清； 3)將血清置于-80°C保存。 |
| 建議送樣量：2ml以上 |
| 4、尿液 Urine |
| 1)無菌容器收集清晨第一次尿液50ml； 2)加入蛋白酶抑制劑混合物（1.67 ml of100mM NaN3, 2.5ml PMSF (2 mg/ml in isopropyl alcohol), 50 µl Leupeptin (1 mg/ml in ddH2O)）； 3)立即處理或置于-80°C保存。 |
| 建議送樣量：20ml以上 |
| 5、腦脊液 Cerebrospinal fluid |
| 1)收集腦脊液，放置冰上靜置30min； 2)4℃ ，2000×g，離心10分鐘，去除細胞或細胞碎； 3)取上清，立即處理或置于-80°C保存。 |
| 建議送樣量：10ml以上 |
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