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生物研發(fā)服務(wù)

激光共聚焦顯微成像和3D圖像分析技術(shù)服務(wù)平臺(tái)

高分辨激光共聚焦顯微鏡可以有效地3D重構(gòu)類(lèi)器官的三維結(jié)構(gòu)，可以有效的結(jié)合類(lèi)器官的特點(diǎn)和激光共聚焦高分辨成像的特點(diǎn)研究藥物在類(lèi)器官水平的有效性和毒理...

服務(wù)類(lèi)別：	分子與細(xì)胞	總訪問(wèn)：	142
最后更新：	2024-8-6	半年訪問(wèn)：	39
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服務(wù)商：上海生物芯片有限公司

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公司簡(jiǎn)介

功能應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
· 細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞骨架如微絲、微管的分布、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、流動(dòng)性、受體、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細(xì)胞凋亡等。
· 生物化學(xué)
酶、核酸、 FISH 、受體分析等。
· 藥理學(xué)
藥物對(duì)細(xì)胞的作用導(dǎo)致細(xì)胞功能和形態(tài)的改變等。
· 遺傳學(xué)和組胚學(xué)
細(xì)胞增殖分化marker表達(dá)定位、細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析等。
· 神經(jīng)生物學(xué)
神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運(yùn)輸和傳遞等。
· 微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)
細(xì)菌、寄生蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)等。
· 病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用
活檢標(biāo)本的快速診斷、自身免疫性疾病的診斷、病理組織切片免疫組化實(shí)驗(yàn)的觀察等。
· 發(fā)育生物學(xué)
觀測(cè)受精卵及早期胚胎發(fā)育、肢體形成、模式生物如（果蠅、線蟲(chóng)、斑馬魚(yú)）的完整生物體成像、類(lèi)器官發(fā)育分化、血管及血流變化等。

功能應(yīng)用領(lǐng)域
高分辨共聚焦成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于自主創(chuàng)新藥物研發(fā)的很多領(lǐng)域：
· 新藥研究領(lǐng)域
抗體藥研究領(lǐng)域：Car-T治療、小分子藥物等在細(xì)胞及亞細(xì)胞信號(hào)腫瘤信號(hào)通路、膜蛋白入核、蛋白相互作用、細(xì)胞膜流動(dòng)性、Ca²⁺變化等相關(guān)研究。
核酸藥物研究領(lǐng)域：高分辨激光共聚焦成像系統(tǒng)是研究納米遞送材料在細(xì)胞和組織內(nèi)有效發(fā)揮作用的必備工具。
神經(jīng)及眼科疾病相關(guān)藥物的研究領(lǐng)域：神經(jīng)類(lèi)疾病需要很多高分辨全玻片掃描的腦片或者脊髓實(shí)驗(yàn)結(jié)果，眼科疾病需要很多全眼或者整個(gè)視網(wǎng)膜的全玻片高分辨的實(shí)驗(yàn)分析需求。

· 類(lèi)器官研究領(lǐng)域
高分辨激光共聚焦顯微鏡可以有效地3D重構(gòu)類(lèi)器官的三維結(jié)構(gòu)，可以有效的結(jié)合類(lèi)器官的特點(diǎn)和激光共聚焦高分辨成像的特點(diǎn)研究藥物在類(lèi)器官水平的有效性和毒理，其也可以用腫瘤類(lèi)器官研究CAR-T藥物或其他藥物的耐藥性。
· 基因治療領(lǐng)域
基因治療需要在組織水平研究AAV的有效性，其迫切需要能夠做全玻片掃描且分辨率高的激光共聚焦分析AAV在組織水平的有效性。

激光共聚焦顯微鏡拍攝--樣品準(zhǔn)備
1. 最好采用共聚焦專(zhuān)用培養(yǎng)皿或載玻片制備樣品（普通細(xì)胞培養(yǎng)皿底部較厚，不能高倍鏡拍攝），載玻片上的樣品最好滴加防淬滅劑并封片處理；
2. 細(xì)胞鋪設(shè)數(shù)量最好不要密集或稀疏，合適的密度有助于采集清晰可靠的熒光信號(hào)；
3. 為了方便采集高質(zhì)量的熒光信號(hào)圖像：請(qǐng)選擇合適的抗體和染劑，抗體和染劑應(yīng)確保在效期內(nèi)，抗體免疫原性相對(duì) 應(yīng)，染色后應(yīng)充分潤(rùn)洗并保存在濕潤(rùn)的避光盒中；
4. 染色后在2小時(shí)內(nèi)盡快進(jìn)行拍攝；
5. 拍攝前確定抗體或染劑的激發(fā)光波段；
6. 樣品運(yùn)輸過(guò)程中全程避光。

激光共聚焦顯微鏡拍攝--常見(jiàn)問(wèn)題
Q1. 為什么拍攝背景較高？
可能由于潤(rùn)洗不充分或樣品污染，應(yīng)確保操作中不要引入外源污染，染色后充分潤(rùn)洗。
Q2. 為什么拍攝圖片的熒光暗淡？
可能是染劑或抗體的質(zhì)量問(wèn)題，樣本不能被特異性標(biāo)記或染色效果較差；也可能因?yàn)闃悠反娣艈?wèn)題如時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，產(chǎn)生熒光淬滅。
Q3. 為什么免疫熒光信號(hào)雜亂，看不到單獨(dú)的細(xì)胞？
可能由于細(xì)胞鋪設(shè)過(guò)密，導(dǎo)致細(xì)胞堆疊，熒光信號(hào)重疊。
Q4. 為什么組織染色，拍攝效果較淡或較深？
可能染劑的濃度和染色時(shí)間不合適，可調(diào)整相應(yīng)的濃度和時(shí)間。

案例分析（一）
細(xì)胞熒光實(shí)驗(yàn)--亞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)分析

細(xì)胞熒光實(shí)驗(yàn)--亞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)分析

顯微圖像分析--IMARIS軟件（9.8版）

案例分析（一）
2D去卷積/降噪

案例分析（二）
降噪/統(tǒng)計(jì)

案例分析（三）
算法模擬形態(tài)分析

MARIS軟件渲染動(dòng)畫(huà)應(yīng)用（9.8版）

案例分析（一）
Multicolor multiscale brain imaging with chromatic multiphoton serial microscopy

案例分析（二）
Imaging plant germline differentiation within Arabidopsis flowers by light sheet microscopy

案例分析（三）
Phenome-based approach identifies RIC1-linked Mendelian syndrome through zebrafish models, biobank associations and clinical studies

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