基因抑制
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容描述:
目標(biāo)基因在指定宿主細(xì)胞中抑制表達(dá),然后分析細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)、調(diào)亡、周期、相關(guān)基因表達(dá)變化等代謝生化指標(biāo)。
客戶需提供以下信息
基因名稱 種屬 genebank號(hào) 片段大小 GC含量
基因是否已克隆、如已克隆載體是什么,提供測(cè)序序列
指定的表達(dá)載體 啟動(dòng)子要求 是否加融合蛋白如His、Myc、GFP等,是否加kazak序列等。
選用何種載體質(zhì);虿《
指定何種宿主細(xì)胞,是否提供
過表達(dá)后監(jiān)控細(xì)胞周期 調(diào)亡
過表達(dá)后監(jiān)控哪些研究基因的表達(dá)變化,核酸還是蛋白水平。
研究哪些生理代謝指標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)流程:
候選RNAi片段載體構(gòu)建
轉(zhuǎn)染質(zhì)粒制備:
篩選有效shRNA載體
轉(zhuǎn)染:提供轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)圖譜。
調(diào)亡數(shù)據(jù)
周期數(shù)據(jù)
基因表達(dá)數(shù)據(jù)核酸(定量PCR)
蛋白(western blot)
整合株篩選:目標(biāo)基因核酸檢測(cè)數(shù)據(jù)、蛋白western blot 檢測(cè)數(shù)據(jù)。細(xì)胞熒光照片。
服務(wù)方提供:每一步的證明材料。
驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn):分步依次驗(yàn)收,分步支付。
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