服務(wù)內(nèi)容;我們根據(jù)客戶(hù)的具體情況,提供不同的方法檢測(cè)SNP,如測(cè)序法、探針?lè)ā①|(zhì)譜法等,保證經(jīng)濟(jì)、高效地達(dá)到客戶(hù)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/div>
完成時(shí)間:根據(jù)實(shí)際工作量而定。
實(shí)驗(yàn)方法:
PCR-測(cè)序法:
最經(jīng)典的方法,通過(guò)PCR擴(kuò)增包含SNP位點(diǎn)的片段,測(cè)序獲得SNP位點(diǎn)信息,適于調(diào)查未知SNP位點(diǎn)和連續(xù)分布(1kb以?xún)?nèi))的SNP位點(diǎn)信息。
PCR-限制性酶切;
如果某個(gè)SNP位點(diǎn)恰好是限制性酶切位點(diǎn),則通過(guò)PCR酶切再結(jié)合電泳分析不失為一種簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的區(qū)分方法,適于單個(gè)的SNP位點(diǎn)分析。
連接酶檢測(cè)反應(yīng)(LDR)分型方法:
連接酶只能連接與模板完全互補(bǔ)的兩個(gè)片段,利用連接酶這一特性,通過(guò)對(duì)需檢測(cè)SNP位點(diǎn)上下游設(shè)計(jì)特異性標(biāo)記探針,在連接酶的作用下,當(dāng)特異性的寡核苷酸探針與互補(bǔ)靶序列DNA完全配對(duì)時(shí)連接反應(yīng)得以順利進(jìn)行,若寡核苷酸探針與其不完全配對(duì),則連接反應(yīng)不能進(jìn)行。最后通過(guò)測(cè)序儀檢測(cè)標(biāo)記的寡核苷酸探針,得到分型結(jié)果,是一種簡(jiǎn)單高效的分型方法,適于樣本量和位點(diǎn)數(shù)目都不大的SNP分析。
Taqman探針?lè)ǎ?/b>
利用TAQMAN探針的熒光顯色原理,分別設(shè)計(jì)不同熒光標(biāo)記的Taqman探針覆蓋相應(yīng)SNP位點(diǎn),完全匹配的探針得到熒光信號(hào)檢測(cè)相應(yīng)的SNP基因型。靈敏度高,適合少數(shù)位點(diǎn)多樣品的SNP掃描。
質(zhì)譜法:
質(zhì)譜是帶電原子、分子或分子碎片按分子量(質(zhì)荷比)的大小順序排列的圖譜。質(zhì)譜儀可通過(guò)對(duì)物質(zhì)的分子量(質(zhì)荷比)進(jìn)行檢測(cè),達(dá)到區(qū)分、鑒別物質(zhì)的目的。SNP位點(diǎn)兩個(gè)等位基因之間存在分子量差異,通過(guò)分型實(shí)驗(yàn)將差異放大,然后以質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)即可達(dá)到SNP分型的目的。
需要客戶(hù)方提供:
客戶(hù)方提供樣品的種屬、類(lèi)型、數(shù)量、需要檢測(cè)的基因位點(diǎn)等詳細(xì)信息。
最終服務(wù)方提供:原始電泳圖譜、儀器相關(guān)文件等原始數(shù)據(jù)和初步的分析結(jié)果。
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