哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)服務(wù)(SC1259)
詳細(xì)信息請(qǐng)?jiān)L問
在過去二十年中, 重組蛋白(r-蛋白),特別是用于結(jié)構(gòu)-功能分析的已純化蛋白,在生物制藥學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛。由于應(yīng)用于該領(lǐng)域的r-蛋白基本上均需要翻譯后修飾,以獲得與天然分子相同的生物活性,而哺乳動(dòng)物細(xì)胞自身具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,因此很多客戶選擇哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)高質(zhì)量的r-蛋白。
如果在您的實(shí)驗(yàn)過程中,出現(xiàn)關(guān)鍵性蛋白折疊問題或E.coli在充裕的時(shí)間內(nèi)仍無法表達(dá)蛋白,或表達(dá)的蛋白質(zhì)量不高等問題時(shí),您可以嘗試金斯瑞哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)服務(wù)。我們的蛋白表達(dá)專家能在四周內(nèi)提供mg級(jí)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的蛋白 ,幫助您快速獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
- 能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性
- 穩(wěn)定及瞬時(shí)蛋白表達(dá)
- 高效啟動(dòng)子(CMV, SV40)控制蛋白表達(dá)
- 表達(dá)水平高
- 大規(guī)模蛋白表達(dá)
服務(wù)內(nèi)容
- 載體構(gòu)建及改進(jìn)
- 不論是穩(wěn)定或是瞬時(shí)表達(dá),金斯瑞均可將客戶的cDNA克隆至客戶或金斯瑞提供的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體中。如果客戶需要,金斯瑞可在每個(gè)表達(dá)載體中添加分泌信號(hào)或標(biāo)簽,以促進(jìn)親和層析后蛋白的最終修復(fù)。對(duì)于更復(fù)雜的方案,如:需要翻譯后特殊修飾,形成復(fù)雜多聚體,多肽內(nèi)或多肽間形成二硫鍵,或特殊的糖基化,金斯瑞推薦定制相關(guān)載體。我們還可以幫助客戶標(biāo)記需要的基因、基因片段或與熒光標(biāo)記相融合(如GFP)。另外,我們能生產(chǎn)并鑒定高效的穩(wěn)定細(xì)胞系,適合客戶擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模以及進(jìn)行cGMP生產(chǎn)。
- 穩(wěn)定基因表達(dá)符合長期生產(chǎn)需求
- 整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作流程,從轉(zhuǎn)染,篩選和細(xì)胞分離,到評(píng)估初步克隆在無血清培養(yǎng)條件下的生產(chǎn)能力和適應(yīng)性,提供長期穩(wěn)定及規(guī)?烧{(diào)的蛋白生產(chǎn)。
- 根據(jù)客戶的需求,金斯瑞將進(jìn)行基因擴(kuò)增,用于氨甲喋呤以及后續(xù)克隆及儲(chǔ)存。我們也具備全面的遺傳學(xué)研究能力,以及無論選擇的介質(zhì)是否存在的情況下生產(chǎn)的穩(wěn)定性。金斯瑞提供細(xì)胞群儲(chǔ)存服務(wù),可用作prebanks預(yù)儲(chǔ)備, masterbanks主要儲(chǔ)備, and working cell banks以及工作元件儲(chǔ)備。
- (TGE) 瞬時(shí)表達(dá)
- 穩(wěn)定基因表達(dá)是將重組基因插入寄主基因組中,但鑒定及檢測重組細(xì)胞系是個(gè)耗時(shí)、昂貴的過程,因此一些客戶,尤其是轉(zhuǎn)包合同或需大規(guī)模制備最優(yōu)化細(xì)胞系的客戶選擇快速制備r-蛋白,快速蛋白制備(能提供mg(毫克)級(jí)至g(克)級(jí))通過使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞TGE滿足這些客戶的需求。與穩(wěn)定基因表達(dá)相比,TGE主要用于短期內(nèi)制備r-蛋白,一般在10天內(nèi)即可快速轉(zhuǎn)染,無需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇。我們的瞬時(shí)表達(dá)使用懸浮細(xì)胞,能輕松表達(dá)毫升至100L的蛋白。適合的表達(dá)載體構(gòu)建完成四周左右,我們就能交付給客戶表達(dá)產(chǎn)物:細(xì)胞培養(yǎng)液收集物或重組蛋白。如果客戶需要,金斯瑞能將客戶的目的基因,克隆入專為TGE系統(tǒng)所設(shè)計(jì)的高效表達(dá)載體中。
- 工藝過程開發(fā)及擴(kuò)大規(guī)模
- 金斯瑞能優(yōu)化表達(dá)過程以及表達(dá)的產(chǎn)物,并能對(duì)增長率,轉(zhuǎn)種率, cell mass細(xì)胞群, 以及更改條件,促進(jìn)特異化生成并測定生產(chǎn)體積等等方面進(jìn)行全面的分析。金斯瑞同樣能按比例降低生產(chǎn)規(guī)模,預(yù)測細(xì)胞表達(dá)量。金斯瑞自主研發(fā)的特異性、高生產(chǎn)效率的表達(dá)系統(tǒng),是提供給客戶高通量生產(chǎn)的最佳保障。
- 15N- 或13C-標(biāo)簽蛋白表達(dá)。
- 純化
- 蛋白表達(dá)后,我們會(huì)富集培養(yǎng)液,收集上清或細(xì)胞,進(jìn)行蛋白純化。金斯瑞常用蛋白純化方式為親和柱純化,同時(shí)也提供凝膠過濾、離子交換及疏水層析等純化方法。初步純化的蛋白經(jīng)特殊蛋白酶去除純化標(biāo)簽后,通過凝膠過濾進(jìn)一步進(jìn)行純化。
- 15N- 或13C-標(biāo)簽蛋白表達(dá)。
- 蛋白鑒定
- 每個(gè)訂單完成后,我們的專家將確認(rèn)金斯瑞交付的產(chǎn)品確實(shí)滿足客戶的需求。一般來說,金斯瑞會(huì)選取以下幾個(gè)或全部檢測方法鑒定表達(dá)的蛋白:染色后進(jìn)行SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)或Native-PAGE(未變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)檢測,蛋白濃度測定,Western blotting檢測,吸收光譜檢測,N末端序列測定,質(zhì)譜分析,核磁共振波譜分析,以及活性檢測,親和層析,離子交換層析,凝膠過濾層析,疏水層析等方法純化蛋白。
服務(wù)特點(diǎn)
服務(wù) |
描述 |
交付內(nèi)容 |
I. 重組載體構(gòu)建及擴(kuò)大化培養(yǎng) |
- 擴(kuò)增/鑒定基因片段或合成目的基因,插入哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體
- qPCR及測序檢測確定亞克隆基因
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- 序列核實(shí)文件
- 實(shí)驗(yàn)程序方案
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II. 瞬時(shí)蛋白表達(dá) |
- 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞(293, CHO)
- 瞬時(shí)表達(dá)
- Western blot檢測已表達(dá)的重組蛋白
- 穩(wěn)定細(xì)胞系的建立
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- 表達(dá)資料
- 瞬時(shí)或穩(wěn)定蛋白表達(dá)細(xì)胞系
- 條件培養(yǎng)液
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III. 小規(guī)模蛋白表達(dá) |
- 少量表達(dá)分析及優(yōu)化表達(dá)
- 細(xì)胞庫擴(kuò)大化培養(yǎng)
- 1-5L的小規(guī)模蛋白表達(dá)
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IV. 大規(guī)模蛋白制備 |
- 細(xì)胞收集物
- Western blot檢測表達(dá)產(chǎn)物
- 最高達(dá)100L的大規(guī)模蛋白制備
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V. 蛋白純化及鑒定 |
- 活性檢測,親和層析,離子交換層析,凝膠過濾層析,疏水層析等方法純化蛋白
- 標(biāo)簽去除
- Western blot, SDS-PAGE, 或測序等方法檢測
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- 已純化的蛋白
- QC文件
- 實(shí)驗(yàn)方案
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金斯瑞是您可靠的基因、多肽、蛋白和抗體研究伙伴,幫助進(jìn)行基礎(chǔ)生命科學(xué)研究,生物藥研究以及早期藥物開發(fā)。自2002年成立以來,金斯瑞發(fā)展迅速,已成為全球領(lǐng)先的生物技術(shù)公司,公司總部位于美國新澤西州,在歐洲、日本和中國均設(shè)立了分公司。金斯瑞一直致力于為全世界的科研機(jī)構(gòu)提供最好的研究服務(wù),已經(jīng)為全世界100多個(gè)國家的科學(xué)家提供了生命科學(xué)研究產(chǎn)品和服務(wù)。我們已經(jīng)建立了最佳通量和質(zhì)量的生物學(xué)研究服務(wù),包括基因合成,分子生物學(xué)服務(wù),多肽合成,定制抗體,蛋白表達(dá),抗體及蛋白質(zhì)工程以及體外和體內(nèi)藥效學(xué)研究,所有的目標(biāo)都是希望讓科研變得更加簡單。
金斯瑞始終以"提供最好的質(zhì)量給客戶,為客戶的利益服務(wù)"為理念;谶@個(gè)理念,我們的管理體系經(jīng)過了ISO9001:2008認(rèn)證,提供的產(chǎn)品達(dá)到cGMP水平,同時(shí)通過了AAALAC及OLAW認(rèn)證,努力為客戶提供最好的服務(wù)。同時(shí),為不同的客戶提供不同的商業(yè)合作模式,包括項(xiàng)目模式,定向全時(shí)制模式,戰(zhàn)略合作聯(lián)盟模式。
金斯瑞特色
同行評(píng)議引用高——金斯瑞是被引用頻率很高的生物科技公司。超過12000篇雜志引用金斯瑞的服務(wù)和產(chǎn)品
基因合成——全球領(lǐng)先的基因合成供應(yīng)商,月堿基通量超過1億bp,最長合成基因達(dá)50 kb,交付周期短至4個(gè)工作日
多肽合成——6000條/月,合成長度達(dá)200 aa
抗體服務(wù)——6000只兔,12000只鼠,最快45天生產(chǎn)多/單克隆抗體,保證免疫反應(yīng)和交付量
蛋白表達(dá)——4個(gè)主要的表達(dá)系統(tǒng)(原核,酵母,昆蟲,哺乳動(dòng)物細(xì)胞),保證純化后的蛋白
生物工程服務(wù)——瞬時(shí)表達(dá),穩(wěn)定細(xì)胞系建立,工藝研發(fā)和放大,物化性質(zhì)鑒定
體外藥效學(xué)服務(wù)——400多種GPCR篩選模型,ADCC & CDC生物大分子體外活性評(píng)價(jià),PD-1/PD-L1/CTLA-4抗體藥物篩選服務(wù)
動(dòng)物模型服務(wù)——4個(gè)關(guān)鍵的體內(nèi)藥效學(xué)服務(wù):體內(nèi)藥物有效性評(píng)價(jià),藥代動(dòng)力學(xué)研究,毒性評(píng)價(jià),生物標(biāo)志物和生物分析服務(wù)
抗體及蛋白質(zhì)工程服務(wù)——單抗測序,抗體人源化,親和力成熟,駱駝單域抗體藥物研發(fā),一站式抗體藥物研發(fā)服務(wù)平臺(tái)
- 產(chǎn)品客服電話:400-025-8686-5810,400-025-8686-5256
- 基因合成/分子生物學(xué)服務(wù)電話:400-025-8686-5820
- 多肽/抗體服務(wù)電話:400-025-8686-5811
- 蛋白/生物工程/細(xì)胞系構(gòu)建/生物藥研發(fā)服務(wù)電話:400-025-8686-5821
- 模式動(dòng)物/抗體藥物研發(fā)/新藥篩選服務(wù)電話:400-025-8686-5809
- 引物合成服務(wù)電話:400-025-8686-5812
- 測序服務(wù)電話:400-025-8686-5813