蛋白表達
- 基因擴增
• 針對目的基因設(shè)計并合成引物。
• PCR擴增目的基因。
• 提供客戶測序報告。
- 載體構(gòu)建
• 將目的基因構(gòu)建到載體質(zhì)粒中。 將重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細胞中，誘導目的基因表達并選擇高表達的菌株，通 過SDS-PAGE、Western Blot來評定小量誘導表達的結(jié)果，估計目的蛋白表達量，制定純化策略。
- 重組蛋白表達
• 高表達細胞的大規(guī)模培養(yǎng)。
• 培養(yǎng)細胞收集并進行裂解。
- 蛋白純化
• 親和層析純化目的蛋白，通過SDS-PAGE、Western Blot分析純化蛋白。
• 最終產(chǎn)品形式為蛋白液或凍干粉，-20℃保存。
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單項服務(wù)名稱 |
時間 |
價格 | |
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A |
引物設(shè)計、合成；PCR擴增目的基因 |
4-6天 |
面議 |
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B |
重組載體構(gòu)建、測序 |
1-2周 |
面議 |
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C |
蛋白小量表達（SDS-PAGE檢測、獲得高表達菌株） |
3天-1周 |
面議 |
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D |
發(fā)酵表達目標蛋白（1L發(fā)酵液） |
3天-1周 |
面議 |
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E |
GST或HIS融合蛋白親和純化 |
1-2周 |
面議 |
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F |
目的蛋白表達檢測分析（包括SDS-PAGE、含量測定） |
3天-1周 |
面議 |
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G |
蛋白Western Blot檢測，ABGENT免費提供GST/HIS標簽抗體用于檢測。 |
1周 |
面議 |
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H |
非融合蛋白及特殊純化 |
面議 |
面議 |
