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密碼子優(yōu)化
威斯騰生物為您解決密碼子優(yōu)化難題。
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功能蛋白的外源宿主表達(dá)是現(xiàn)代生物技術(shù)的基礎(chǔ),然而很多蛋白由于可能包含有抑制表達(dá)的因子:如有機(jī)體使用了不常用的密碼子等,在外源宿主中很難表達(dá)。日益發(fā)展的基因設(shè)計(jì)與合成技術(shù)使通過基因設(shè)計(jì)改善蛋白表達(dá)成為可能,例如,可以通過基因設(shè)計(jì)使基因與宿主的密碼子使用頻率相匹配來提高蛋白表達(dá)水平。威斯騰基因設(shè)計(jì)不僅包括密碼子優(yōu)化,還包括mRNA結(jié)構(gòu)修正、翻譯起始位點(diǎn)的優(yōu)化等。

將低利用率的密碼子替換成宿主常用密碼子

通;蛑邪拿艽a子在特定宿主中的利用率越低,該種蛋白的表達(dá)量也就越少,甚至當(dāng)這種密碼子存在與蛋白簇間或者N末端的時(shí)候表達(dá)量會(huì)更少。在不改變氨基酸序列的前提下將低利用率的密碼子替換為宿主常用密碼子能提高功能蛋白的表達(dá)水平。

去除問題密碼子

任何來源的密碼子如果在宿主生物體內(nèi)的利用率低于5%到10%時(shí), 就會(huì)出現(xiàn)表達(dá)抑制,當(dāng)這些低利用率密碼子臨近或相連時(shí), 對(duì)蛋白表達(dá)的影響更大。去除低利用率的密碼子或者容易被誤讀為終止信號(hào)的密碼子能夠防止低表達(dá)或者不表達(dá)。

哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)病毒蛋白

病毒基因經(jīng)過合適的處理也能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞成功表達(dá),病毒基因密集的信息常常引起閱讀框重疊,許多病毒基因能夠逆序編碼。病毒基因不僅表達(dá)目的蛋白也表達(dá)調(diào)控元件,因此能夠平均提高蛋白表達(dá)量達(dá)28%。通過對(duì)病毒密碼子進(jìn)行優(yōu)化以增加靶點(diǎn)免疫原性對(duì)于DNA疫苗的研究非常重要。

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