一【檢測步驟】
、測定前須知:
1. 使用之前將所有試劑和所需板條回溫(20~25℃)。
2. 使用之后立即將所有試劑及剩余的板條放置2~8℃。
3. ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA操作中的要點(diǎn)。
4. 在所有的恒溫孵育過程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。
二、操作步驟:
1. 將所需試劑從微孔板中取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。
2. 取出所需數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封,保存于2~8℃。不要冷凍。
3. 洗滌工作液在使用前也需回溫。
4. 將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5. 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml到對應(yīng)的微孔中,加入酶標(biāo)物50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6. 小心揭開蓋板膜,用洗滌工作液充分洗滌300ml/孔, 洗板5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。
7. 加入顯色液100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)30min。
8. 加終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)酶標(biāo)儀于450nm處讀每孔OD值。
【注意事項】
1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復(fù)到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3. 每種試劑使用前均需搖勻。
4. 反應(yīng)終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。
5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6. 儲存條件:
試劑盒保存于2~8℃,不要冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感,因此要避光保存。
7. 試劑變質(zhì)的跡象:
顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8. 加入顯色液后,一般顯色時間為15~30min。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應(yīng)時間。
9. 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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Pribolab(普瑞邦),長期專注于食品安全檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù),致力于產(chǎn)品與技術(shù)創(chuàng)新,不斷研發(fā)和拓寬檢測領(lǐng)域,提供真菌毒素、食品過敏原、轉(zhuǎn)基因、獸藥殘留檢測、酶法生物分析前處理用親和柱、多功能凈化柱、ELISA試劑盒/膠體金試紙條、固體/液體標(biāo)準(zhǔn)品、13C穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)、質(zhì)控樣品及應(yīng)用于前處理的自動化儀器(全自動多樣品均質(zhì)器、全自動標(biāo)準(zhǔn)配制儀、自動化免疫親和操作儀、多功能光電衍生系統(tǒng)等)。普瑞邦不僅僅為客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,同時提供自動化樣品前處理的解決方案。普瑞邦始終秉承“持續(xù)創(chuàng)新”的理念,以優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品賦于檢測精準(zhǔn),以創(chuàng)新技術(shù)推進(jìn)行業(yè)發(fā)展,致力于為行業(yè)提供高品質(zhì)產(chǎn)品和解決方案。
青島普瑞邦生物工程有限公司,是新加坡普瑞邦在中國設(shè)立的綜合性技術(shù)服務(wù)中心。Pribolab(普瑞邦)是面向全球提供真菌毒素解決方案的主要服務(wù)商之一,憑借強(qiáng)大的研發(fā)團(tuán)隊和專業(yè)的真菌毒素檢測技術(shù)的研究,為全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、食品加工與糧食、飼料工業(yè)等行業(yè)提供專業(yè)的真菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù),同時為社會提供食品、飼料及飲料等的真菌毒素、食品成分等檢測分析。
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2. 親和柱容量大,抗體含量高,增加了樣品吸附量,提高了純化效率。
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4. 產(chǎn)品通過大量的科學(xué)實(shí)驗檢驗,擁有良好的穩(wěn)定性和可靠性,樣品回收率達(dá)到90%‐95%。
5. 產(chǎn)品通用性強(qiáng),適合多種緩沖液體系,無需復(fù)雜和有毒試劑。
6. 操作簡單快速,單個樣品只需10-15 分鐘。適用性強(qiáng),無需特定的實(shí)驗環(huán)境。
7. 純化樣品適用于 ELISA 法,高效液相色譜法,熒光光度法等。
PriboFast 免疫親和柱系列(3ml)
PriboFast黃曲霉毒素總量免疫親和柱25T
PriboFast黃曲霉毒素B1 免疫親和柱25T
PriboFast黃曲霉毒素M1免疫親和柱25T
PriboFast 玉米赤霉烯酮 免疫親和柱25T
PriboFast嘔吐毒素 免疫親和柱25T
PriboFast 赭曲霉毒素 免疫親和柱25T
PriboFast 伏馬毒素 免疫親和柱25T
PriboFast T-2/HT-2免疫親和柱25T
PriboFast酶聯(lián)免疫檢測試劑盒系列:
PriboFast系列試劑盒全是采用直接競爭法,檢測時間短,步驟簡單,性能穩(wěn)定,檢測限符合國標(biāo)要求。
黃曲霉毒素總量 ELISA試劑盒 96T
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黃曲霉毒素B1 ELISA試劑盒 96T
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柱系列:
包括有兩種類型 柱壓型(帶玻璃試管)/推桿型(針筒式)
PriboFast系列多功能凈化柱采取的方法就是多重機(jī)制吸附雜質(zhì)并快速萃取凈化的方法。
PriboFast系列多功能凈化柱,能夠及時快速地對從食品、飼料、飲料、藥材中提取的待檢液進(jìn)行凈化,使用快捷、方便,減少萃取步驟,有效保證分析的更加準(zhǔn)確可靠,降低檢測成本,有效提高檢測效率。
PriboFast 226/260多功能凈化柱(黃曲霉毒素,玉米赤霉烯酮)25T
PriboFast 228/280多功能凈化柱(黃曲霉毒素,展青霉素)25T
PriboFast 227/270(適用單端孢霉烯族毒素) 25T
PriboFast 210 凈化柱(適用于伏馬毒素檢測)25T
PriboFast 290凈化柱(適用于赭曲霉毒素檢測)25T
PriboFast 230凈化柱(適用于環(huán)匹阿尼酸檢測)25T