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生物研發(fā)服務(wù)

【海馬側(cè)腦室玻璃體立體定位注射AAv慢、腺病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)】

專業(yè)海馬側(cè)腦室玻璃體立體定位注射AAv腺病毒慢病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)

服務(wù)類別：	其他生物研發(fā)	總訪問：	2009
最后更新：	2022-8-8	半年訪問：	50
參考報(bào)價(jià)：	海馬側(cè)腦室玻璃體立體定位注射AAv腺病毒慢病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)
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服務(wù)商：至善（北京）健康醫(yī)學(xué)研究院

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服務(wù)介紹
公司簡介

一、海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

1. 了解腦立體定位技術(shù)。

2. 掌握腦立體定位儀及腦圖譜的使用方法。

二、海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)實(shí)驗(yàn)原理

腦立體定位技術(shù)被廣泛的運(yùn)用于腦的損毀、刺激和腦電記錄的精確定位中，成為研究腦結(jié)構(gòu)和功能必不可少的工具。腦立體定位技術(shù)主要是使用腦立體定位儀作為定位儀器，利用某些顱骨外面的標(biāo)志（如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢狀縫等）或其它參考點(diǎn)所規(guī)定的三度坐標(biāo)系統(tǒng)，來確定皮層下某些神經(jīng)結(jié)構(gòu)的位置，以便在非直視暴露下對其進(jìn)行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導(dǎo)電位等研究，是神經(jīng)解剖、神經(jīng)生理、神經(jīng)藥理和神經(jīng)外科等領(lǐng)域內(nèi)的重要研究方法。常用的實(shí)驗(yàn)動物，如大鼠、小鼠、貓等高等哺乳動物以及鳥類，其均有完全的外耳道，可用（耳棒）來定位。在確定了顱外標(biāo)記之后，就可按腦立體定位圖譜所提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行定位操作。

三、海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)實(shí)驗(yàn)器材

腦立體定位注射儀，微操作儀，常規(guī)手術(shù)器械，鉆孔針，紗布，干棉球，酒精，0.4%戊巴比妥鈉（麻醉劑，現(xiàn)配現(xiàn)用），生理鹽水，1ml注射器，3%雙氧水，小白鼠。

四、海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟

1.海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)腦定位儀的使用

1.1 校驗(yàn)儀器

定位儀經(jīng)過搬動或長期不用后，使用前需先加以校驗(yàn)。重點(diǎn)是檢驗(yàn)電極移動架各滑尺是否保持直角，可用三角板測定各滑尺所成的角度是否是直角；各銜接部與螺絲有沒有松動；滑尺是否太松；檢查主框兩臂的平行情況；最后觀察固定頭的裝置兩側(cè)對稱程度，小框是否與主框平行。檢查儀器無故障后，可進(jìn)行下列校驗(yàn)性操作：

（1）將兩側(cè)耳桿柱旋松，在主框上前后滑動，然后再按照原規(guī)定刻度裝好，看兩側(cè)耳桿尖是否完全對正。

（2）取下一側(cè)耳桿，將一側(cè)電極移動架裝好，前后左右上下移動各滑尺，使裝在電極夾上的金屬定位針尖正對耳桿尖的中心，記下各滑尺的刻度讀數(shù)，再卸下移動架再裝上，并按上法測定耳桿尖的部位，記下三個(gè)滑尺的讀數(shù)，反復(fù)操作取平均數(shù)首先將放置水平的腦立體定位儀上的兩個(gè)滑道，按實(shí)驗(yàn)的要求調(diào)節(jié)好合適的高度后。

（3）然后再用水平尺調(diào)正好兩個(gè)滑道的前后、左右水平。這時(shí)再把安置在滑道上的手動微推進(jìn)器按上面的刻度調(diào)節(jié)垂直。

1.2 確定腦立體定位零點(diǎn)，小鼠腦定位的系統(tǒng)大致分兩種：

（1）用耳間線中心定位，首先將兩個(gè)耳棒尖端在定位儀滑道中間部位彼此相接觸（兩個(gè)耳棒讀數(shù)相同），旋緊鏍絲。然后取下一側(cè)耳棒，另一耳棒不動。調(diào)節(jié)移動推進(jìn)器，使校驗(yàn)電極尖端與耳棒尖端的中心點(diǎn)相觸，即為A點(diǎn)（即耳間線中心點(diǎn)），并記下刻度值。然后，將推進(jìn)器水平移動到門齒鉤的上方，將門齒鉤平面與校驗(yàn)電極尖端相觸。這時(shí)就定出外耳道中心點(diǎn)與門齒牙板上面上沿之間的水平切面0點(diǎn)，記為H0。這時(shí)，動物的前囟和后囟基本處在一個(gè)水平面上，相差0-0.1mm。另外，規(guī)定耳間線中心點(diǎn)以上為+，向下為-；向嘴側(cè)為+，向尾側(cè)為-。

（2）用顱骨標(biāo)志定位（常用前囟），即以前囟為嘴尾側(cè)0點(diǎn)，由前囟向嘴側(cè)為+，向尾側(cè)為-，其它與上面定位方法相同（圖示）。

2. 海馬側(cè)腦室腦立體定位注射AAv病毒實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

（1）動物麻醉：小鼠，體重20-30g，稱重后以0.4%戊巴比妥鈉腹腔麻醉注射時(shí)必須緩慢，隨時(shí)注意動物狀態(tài)。

（2）小鼠頭部固定：將小鼠的門齒固定于腦定位儀上頜固定器，然后把一側(cè)的耳捧推入動物的外道后，使動物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側(cè)的外耳道。這時(shí)觀察兩個(gè)耳棒的刻度一致后，將兩耳棒上的固定螺絲扭緊，在將牙齒固定器上壓鼻環(huán)壓下后扭緊（鼻環(huán)、耳棒的松緊度調(diào)節(jié)適宜為好），這時(shí)從各個(gè)方向推壓動物頭部"均不會出現(xiàn)移動。

（3）開顱鉆孔前的備皮：剪去動物頭部毛，用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的消毒，沿矢狀縫作一3cm長的皮膚切口，分離皮下組織，用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離，推開骨膜，暴露前囟、人字縫及矢狀縫。

（4）確定標(biāo)準(zhǔn)中線：將金屬定位針向下移動到矢狀縫上方后，再前后移動定位針，使定位針定位到前囟。

（5）小鼠海馬定位：用定位針在前囟后2mm, 矢狀縫旁開2.5mm處定位一點(diǎn)，即為海馬的平面位置，然后在此點(diǎn)上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。

（6）注射藥物：小鼠海馬則位于該圓孔下2 mm，將1ml注射器吸入藥物安置到MC-5微操作儀上，操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時(shí)完成藥物注射到小鼠腦海馬處。

（7）制作腦組織切片：將小鼠腦制作成切片，顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來驗(yàn)證小鼠腦海馬中是否定位準(zhǔn)確

至善健康醫(yī)學(xué)研究院成立于2005年，專業(yè)從事胚胎干細(xì)胞、分子生物醫(yī)學(xué)及基因工程動物模型敲除的技術(shù)研發(fā)、大鼠小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)及大鼠小鼠海馬側(cè)腦室aav病毒立體定位注射動物實(shí)驗(yàn)服務(wù)，視網(wǎng)膜玻璃體定位注射實(shí)驗(yàn)服務(wù)，分子生物醫(yī)學(xué)科研動物病理生理實(shí)驗(yàn)外包動物病理醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)外包技術(shù)服務(wù)，提供老年老齡sd大鼠及c57老年小鼠，設(shè)有干細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和基因工程動物表型分析實(shí)驗(yàn)室，可提供用于科學(xué)研究和藥物研發(fā)的各類動物胚胎干細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞、成體細(xì)胞、基因工程干細(xì)胞株、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及相關(guān)培養(yǎng)基，同時(shí)提供基因敲除小鼠訂購、轉(zhuǎn)基因小鼠訂購、基因沉默小鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠等基因工程動物模型的構(gòu)建和基于干細(xì)胞的藥物研發(fā)服務(wù)。

隨業(yè)務(wù)范圍的擴(kuò)大，公司面向海內(nèi)外征集細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品的合作伙伴。經(jīng)營范圍：基因敲除小鼠模型建立、銷售基因敲除小鼠、銷售轉(zhuǎn)基因小鼠、顯微注射、基因打靶、條件性敲除、定點(diǎn)敲除轉(zhuǎn)基因載體、基因沉默（siRNA）和質(zhì)粒DNA表達(dá)載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)；胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)；基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建；各種細(xì)胞株（人胚胎干細(xì)胞、小鼠胚胎干細(xì)胞、iPS細(xì)胞、成體干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞）；細(xì)胞培養(yǎng)基；質(zhì)粒載體；超純水、雙蒸水、去離子水、醫(yī)用蒸餾水銷售小鼠基因敲除小鼠服務(wù)價(jià)格，RNA干擾載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)，人胚胎干細(xì)胞、小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)，基因沉默小鼠構(gòu)建技術(shù)服務(wù)，siRNA載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)，基因沉默構(gòu)建技術(shù)服務(wù)，載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)，RNAi表達(dá)載體構(gòu)建服務(wù)，轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建，細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)，分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)， pcDNA載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù)，siRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)，細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)。

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