原核蛋白表達(dá)經(jīng)典套餐,VIP套餐
百恩維生物已成功構(gòu)建完整的各種蛋白表達(dá)技術(shù)平臺(tái):包括原核蛋白表達(dá)與純化、昆蟲(chóng)蛋白表達(dá)與純化、哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)與純化。根據(jù)客戶的需求,我們提供從基因合成,質(zhì)粒構(gòu)建,基因表達(dá),蛋白純化、檢測(cè)等一站式服務(wù)。為了保證蛋白純化的質(zhì)量,百恩維生物建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品質(zhì)控體系及一整套完善的客戶服務(wù)流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及一流的服務(wù)。
我們的蛋白質(zhì)團(tuán)隊(duì)在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面,擁有極其豐富的經(jīng)驗(yàn)?梢詽M足客戶個(gè)性化的需求。
原核表達(dá)是將植物、動(dòng)物、微生物等的目的基因插入合適載體后導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)出大量目的蛋白。這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應(yīng)用。大腸桿菌用于表達(dá)重組蛋白有以下優(yōu)點(diǎn):易于生長(zhǎng)和控制;易于培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)少;可選擇多種大腸桿菌菌株及與之匹配的具各種特性的質(zhì)粒。原核表達(dá)系統(tǒng)是迄今為止最為成熟可靠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。
原核表達(dá)技術(shù)服務(wù)按步驟收費(fèi),您可以選擇從以下任意一步開(kāi)始提供服務(wù)或僅選擇其中的單獨(dú)一步,詳細(xì)價(jià)格請(qǐng)垂詢。
如需前期分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)參考相關(guān)內(nèi)容。
服務(wù)特色:
1、 一站式解決方案,從基因合成到蛋白表達(dá)純化,完成您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
2、 技術(shù)成熟穩(wěn)定/方法手段齊全。
3、 服務(wù)周期短。
原核表達(dá)(E. coli )技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
1、 基因合成,
提供客戶:合成的基因及測(cè)序序列。
時(shí)間: 1~2周
2、 質(zhì)粒構(gòu)建,(表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選。
擴(kuò)增并抽提構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒。
將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到高效的E. coli表達(dá)菌株中。
至少挑選數(shù)個(gè)陽(yáng)性克隆于LB培養(yǎng)基中擴(kuò)增并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
電泳檢測(cè),菌株中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況,并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。
提供客戶:重組質(zhì)粒的表達(dá)菌株及表達(dá)檢測(cè)報(bào)告。
時(shí)間: 1~2周
3、 搖瓶培養(yǎng)重組細(xì)菌,誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽(Tag),再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白(可選,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需加入合適的蛋白酶切位點(diǎn))。
百恩維會(huì)通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
提供客戶:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)95%以上。時(shí)間: 2~3周
4、 大規(guī)模蛋白制備:
蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化
提供客戶:合格的目標(biāo)蛋白及服務(wù)報(bào)告。
時(shí)間:協(xié)商
5、 蛋白復(fù)性服務(wù)。
利用不同復(fù)性緩沖液的體系,對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行小量復(fù)性試驗(yàn)提供復(fù)性后樣品供客戶檢測(cè)。可根據(jù)客戶要求,按照其中一種樣品的復(fù)性條件制備小量的復(fù)性蛋白。百恩維可提供具體的復(fù)性緩沖液配方及復(fù)性工藝。
其他:內(nèi)毒素去除,除菌,凍干等進(jìn)一步加工。
詳細(xì)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的質(zhì)量。
提供客戶:加工后的終產(chǎn)品及相關(guān)實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)報(bào)告。
時(shí)間:1~2周
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