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非標(biāo)定量磷酸化

非標(biāo)定量磷酸化


Quantitative phosphoproteomics (Label-free)
康成生物提供標(biāo)準(zhǔn)的定量磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)一站式服務(wù)，您只需提供保存完好的生物樣品，康成專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)為您完成從樣品制備到數(shù)據(jù)分析全部過(guò)程，并且提供完整的分析報(bào)告。
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最后更新：2018-11-26半年訪問(wèn)：15
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非標(biāo)定量磷酸化

 

    蛋白質(zhì)磷酸化是一種重要的翻譯后修飾（PTM），它動(dòng)態(tài)可逆的調(diào)控細(xì)胞中幾乎任意一個(gè)生物學(xué)過(guò)程。磷酸化信號(hào)通路的失調(diào)是癌癥等諸多疾病的標(biāo)志性事件，同時(shí)蛋白激酶也是許多藥物的主要作用靶點(diǎn)，因此具有極大的研究?jī)r(jià)值。伴隨著基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)和磷酸化多肽富集方法以及高通量定量技術(shù)的不斷發(fā)展，磷酸化蛋白組學(xué)已經(jīng)成為目前最為成熟的PTM研究方向。TiO2 對(duì)磷酸化多肽具有很高的特異性，廣泛運(yùn)用于絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸（pSTY）的磷酸化富集研究；酪氨酸磷酸化（pY）豐度往往較低，TiO2富集后也較難檢測(cè)，通常需要采用特異性抗體進(jìn)行富集，或與TiO2 串聯(lián)富集。結(jié)合磷酸化富集技術(shù)的高效性與質(zhì)譜技術(shù)的高通量，深入研究在各種生理病理?xiàng)l件下磷酸化蛋白組動(dòng)態(tài)變化過(guò)程變得實(shí)際可行且意義重大。

圖1. 定量磷酸化蛋白組技術(shù)原理和磷酸化信號(hào)調(diào)控的多種生物學(xué)過(guò)程。

 

    康成生物提供標(biāo)準(zhǔn)的定量磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)一站式服務(wù)，您只需提供保存完好的生物樣品，康成專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)為您完成從樣品制備到數(shù)據(jù)分析全部過(guò)程，并且提供完整的分析報(bào)告。如果酪氨酸磷酸化是您的重點(diǎn)關(guān)注對(duì)象，我們還將提供pY深度富集和分析服務(wù)。

樣品要求

樣品類型

樣品要求

蛋白質(zhì)提取物

濃度 >1μg/μl，蛋白質(zhì)總量 >4mg

細(xì)胞樣品

細(xì)胞量 >2×107

組織樣品

動(dòng)物、微生物組織濕重 >100mg
注：酪氨酸磷酸化需要更多的蛋白樣品，詳情請(qǐng)咨詢康成生物技術(shù)人員。

實(shí)驗(yàn)流程

非標(biāo)定量


案例展示
    運(yùn)用高通量label-free定量磷酸化蛋白組學(xué)技術(shù)分析極短時(shí)間（30s）和中等時(shí)間（10min）段內(nèi)胰島素刺激對(duì)蛋白磷酸化水平的影響，據(jù)此來(lái)研究早期胰島素信號(hào)傳遞過(guò)程和動(dòng)態(tài)調(diào)控關(guān)系。
    運(yùn)用高通量磷酸化蛋白組學(xué)技術(shù)研究胰島素在0-30s以及0-10min時(shí)間段內(nèi)蛋白磷酸化水平變化趨勢(shì)（a）。對(duì)時(shí)間分辨的磷酸化蛋白組數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，能夠發(fā)現(xiàn)胰島素信號(hào)通路中的功能相關(guān)節(jié)點(diǎn)，粗體顯示節(jié)點(diǎn)中的新成員（b）。

 

   根據(jù)蛋白磷酸化水平變化模式，發(fā)現(xiàn)新的生物學(xué)現(xiàn)象：（a）兩個(gè)相距很近的磷酸化位點(diǎn)具有截然不同的磷酸化模式，意味著不同的調(diào)控模式。（b）研究信號(hào)通路間的cross-talk。由Frs2介導(dǎo)的INSR通路與FGFR通路間的cross-talk。

 

 

 

上海康成生物工程有限公司 
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