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多肽固相合成
合肥國肽生物科技有限公司(簡稱:國肽生物TM)成立于2014年,是一家專業(yè)從事多肽產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售以及多肽技術(shù)轉(zhuǎn)讓的高新技術(shù)企業(yè)。
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多肽的固相合成
多肽的合成是氨基酸重復(fù)添加的過程,通常從C端向N端(氨基端)進(jìn)行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接,再以該氨基酸N端為合成起點(diǎn),經(jīng)過脫去氨基保護(hù)基和過量的已活化的第二個氨基酸進(jìn)行反應(yīng),接長肽鏈,重復(fù)操作,達(dá)到理想的合成肽鏈長度,最后將肽鏈從樹脂上裂解下來,分離純化,獲得目標(biāo)多肽。

1、Boc多肽合成法
Boc方法是經(jīng)典的多肽固相合成法,以Boc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基,芐醇類作為側(cè)鏈保護(hù)基,Boc的脫除通常采用三氟乙酸(TFA)進(jìn)行。多肽合成時將已用Boc保護(hù)好的N-α-氨基酸共價交聯(lián)到樹脂上,TFA切除Boc保護(hù)基,N端用弱堿中和。
肽鏈的延長通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)活化、偶聯(lián)進(jìn)行,最終采用強(qiáng)酸氫氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)將合成的目標(biāo)多肽從樹脂上解離。在Boc多肽合成法中,為了便于下一步的多肽合成,反復(fù)用酸進(jìn)行脫保護(hù),一些副反應(yīng)被帶入實(shí)驗(yàn)中,例如多肽容易從樹脂上切除下來,氨基酸側(cè)鏈在酸性條件不穩(wěn)定等。

2、Fmoc多肽合成法
Carpino和Han以Boc多肽合成法為基礎(chǔ)發(fā)展起來一種多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。
Fmoc多肽合成法以Fmoc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基。其優(yōu)勢為在酸性條件下是穩(wěn)定的,不受TFA等試劑的影響,應(yīng)用溫和的堿處理可脫保護(hù),所以側(cè)鏈可用易于酸脫除的Boc保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)。
肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)從樹脂上定量完成,避免了采用強(qiáng)酸。同時,與Boc法相比,F(xiàn)moc法反應(yīng)條件溫和,副反應(yīng)少,產(chǎn)率高,并且Fmoc基團(tuán)本身具有特征性紫外吸收,易于監(jiān)測控制反應(yīng)的進(jìn)行。Fmoc法在多肽固相合成領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛。
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