SPR分子互作動力學

 

       表面等離子共振（SPR, Surface Plasmon Resonance）是一種光學物理現(xiàn)象。當偏振光以臨界角入射到兩種不同折射率的介質界面（比如玻璃表面的金或銀鍍層）時，可引起金屬薄膜內自由電子的共振，使反射光在一定角度內大大減弱。其中，使反射光在一定角度內完全消失的入射角稱為SPR角。可以通過監(jiān)測生物反應過程中SPR角的動態(tài)變化，得到生物分子之間結合和相互作用的特異性信號。

 

 

 

 

       利用SPR表面等離子共振這種特殊的物理現(xiàn)象，將一種生物分子（靶分子）偶聯(lián)在生物傳感器表面，再將含有另一種能與靶分子產(chǎn)生相互作用的生物分子（分析物）的溶液注入并流經(jīng)傳感器表面。分子間的結合引起傳感器表面質量增加，導致折射指數(shù)按同樣的比例增強，生物分子間反應的變化即被監(jiān)測到。通過不同濃度梯度和溫度梯度的分析物的注入，即可觀察到分析物與靶分子的相互作用在分析物濃度或溫度變化后引起的SPR角改變，進而可以繪制出兩種分析物相互作用的SPR分子互作動力學曲線，計算出Kd 結合常數(shù)。SPR分子互作動力學技術已經(jīng)成為目前定性和定量監(jiān)測兩種不同分子間結合程度的標準方法。

|   SPR分子互作儀器設備

       Biacore 8K：高通量與高質量互作數(shù)據(jù)兼得

1. 滿足化藥與生物治療新藥創(chuàng)制的高通量篩選表征平臺

2. 高通量，16組檢測通道，8根進樣針平行分析

3. 60小時無人值守作業(yè)，4-40°C樣品倉支持4塊96/384孔板

4. 高靈敏度，<0.02RU低噪音水平，滿足小分子量樣品和超低偶聯(lián)分析

5. 全新的ABA、2D Kinetics模塊，滿足藥物競爭抑制實驗、條件摸索和快速動力學表征。

 

 

 

 

|   SPR分子互作技術特點

1. 通過傳感芯片可實時、原位和動態(tài)監(jiān)測生物分子間的相互作用過程，適用于各類生物體系的測定，小分子-蛋白質，蛋白質-蛋白質，DNA-蛋白質，DNA-DNA等；

2. 研究抗原-抗體特異性、配體-受體相互作用、蛋白復合物；

3. 樣品無需標記，通過檢測SPR角度變化，獲得分析物的濃度、親和力、動力學常數(shù)和特異性等信息；

4. 對復合物的定量測定不干擾反應的平衡，確保檢測結果的穩(wěn)定可靠性；

5. 實驗設計方法靈活，提供高通量、高質量的分析數(shù)據(jù)。

|   SPR分子互作實驗流程

|   相關文獻

[1].  Li W, Kou J, Qin J, et al. NADPH levels affect cellular epigenetic state by inhibiting HDAC3-Ncor complex. Nat Metab,2021,3(1):75-89. 中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所
[2].  Pan B W, Shi Y, Li W C, et al. Synthesis and biological evaluation of Vinpocetine derivatives. Bioorg Med Chem Lett,2020,30(2):126472. 北京大學
[3].  Shi R, Shan C, Duan X, et al. A human neutralizing antibody targets the receptor-binding site of SARS-CoV-2. Nature,2020,584(7819):120-124. 中科院微生物所
[4].  Shi Y, Pan B W, Li W C, et al. Synthesis and biological evaluation of Isosteviol derivatives as FXa inhibitors. Bioorg Med Chem Lett,2020,30(2):126585. 北京大學
[5].  Wang K, Sun Q, Zhong X, et al. Structural Mechanism for GSDMD Targeting by Autoprocessed Caspases in Pyroptosis. Cell,2020,180(5):941-955. 中科院生物物理所
[6].  Wang Q, Zhang Y, Wu L, et al. Structural and Functional Basis of SARS-CoV-2 Entry by Using Human ACE2. Cell,2020,181(4):894-904. 中科院微生物所
[7].  Yang J, Wang W, Chen Z, et al. A vaccine targeting the RBD of the S protein of SARS-CoV-2 induces protective  immunity. Nature,2020,586(7830):572-577. 四川大學
[8] . Zhang Z, Zhang H, Xu L, et al. Selective usage of ANP32 proteins by influenza B virus polymerase: Implications in  determination of host range. PLoS Pathog,2020,16(10):e1008989. 中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所