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大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)
E. coli具有遺傳背景清晰、細(xì)胞增殖快、成本低、表達(dá)量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn),適用于多種蛋白的表達(dá)。大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。
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E. coli具有遺傳背景清晰、細(xì)胞增殖快、成本低、表達(dá)量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn),適用于多種蛋白的表達(dá)。大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。缺點(diǎn)是該表達(dá)系統(tǒng)易形成包涵體,含有內(nèi)毒素,沒(méi)有翻譯后修飾的加工功能。該系統(tǒng)適用于表達(dá)原核來(lái)源的蛋白或不需要翻譯后修飾的真核來(lái)源蛋白,特別是小分子蛋白。

藍(lán)景科信擁有豐富的E. coli蛋白表達(dá)純化經(jīng)驗(yàn),熟練運(yùn)用多種表達(dá)宿主菌,提供多種表達(dá)載體和標(biāo)簽的選擇。


優(yōu)勢(shì):

遺傳背景清晰、細(xì)胞增殖快;成本低、表達(dá)量高、穩(wěn)定性好;抗污染能力強(qiáng);
 

原核E.coli蛋白表達(dá)服務(wù)內(nèi)容
步驟 內(nèi)容 交付內(nèi)容 周期
密碼子優(yōu)化及基因合成 客戶提供目的蛋白對(duì)應(yīng)的CDS序列信息或質(zhì)粒   1-2周
載體構(gòu)建
  • 克隆至合適的表達(dá)載體

  • 質(zhì)粒測(cè)序

  • 質(zhì)粒制備

測(cè)序結(jié)果 1-2周
表達(dá)鑒定
  • 10 mL小量表達(dá)

  • 3種表達(dá)條件嘗試

  • 蛋白表達(dá)評(píng)估(SDS-PAGE) 

表達(dá)評(píng)估報(bào)告 1-2周
大量表達(dá)和純化
  • 蛋白純化(可溶表達(dá))

  • 蛋白變性復(fù)性純化 (包涵體)

  • QC分析(SDS-PAGE)

1-3 mg純化蛋白,純度>85% 1-2周
工業(yè)級(jí)表達(dá)及純化(可選)
  • 放大培養(yǎng)(根據(jù)具體需求量)

  • 親和純化

  • 純化蛋白檢

蛋白純度鑒定報(bào)告

成品蛋白

根據(jù)表達(dá)體積商定


表達(dá)案例:

 

M:Molecular weight marker

S:Supernatant of cell lysate

P:Precipitation of cell lysate

FT:Flow through

W1:Wash 1

W2:Wash 2

W3:Wash 3

E:Elution from Ni-NTA

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