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Halo Pull Down服務(wù)
檢測已經(jīng)蛋白質(zhì)之間的相互作用,鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白
服務(wù)類別:其他生物研發(fā)總訪問:199
最后更新:2024-8-6半年訪問:27
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  • 公司簡介

Halo Pull Down技術(shù)是將Halo標(biāo)簽的融合蛋白固相化到磁珠上,與細(xì)胞總蛋白進(jìn)行孵育,鑒定與之相互作用的蛋白。該方法可以鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白,也可以鑒定兩個已知蛋白間是否存在相互作用。

我們的Halo PullDown技術(shù)服務(wù)利用無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)來表達(dá)Halo標(biāo)簽的融合蛋白(誘餌蛋白),節(jié)省時間,蛋白表達(dá)載體構(gòu)建成功后,不需要轉(zhuǎn)化和鑒定,可直接表達(dá)目的蛋白。 蛋白表達(dá)成功后進(jìn)行純化,將純化后的蛋白與細(xì)胞裂解液孵育一段時間后,洗去上清蛋白,將與目的蛋白結(jié)合的蛋白洗脫,并進(jìn)行質(zhì)譜檢測。
 

步驟 內(nèi)容 交付內(nèi)容 周期
載體構(gòu)建
  • 客戶提供目的蛋白對應(yīng)的CDS的序列或質(zhì)粒,

  • 克隆至合適的表達(dá)載體,

  • 質(zhì)粒測序,

  • 質(zhì)粒制備。

測序結(jié)果 1-2周
無細(xì)胞表達(dá)+純化
  • 用小麥芽胚蛋白表達(dá)體系進(jìn)行蛋白表達(dá),

  • 蛋白表達(dá)評估 (Western Blot) 。

表達(dá)評估報(bào)告 1周
Pull Down
  • 細(xì)胞裂解,

  • 目的蛋白和總蛋白孵育,

  • 洗脫與目的蛋白結(jié)合的蛋白。

銀染結(jié)果 1周
質(zhì)譜檢測
  • 將洗脫的蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。
質(zhì)譜結(jié)果 2周
 
客戶提供材料 交付結(jié)果

新鮮樣本(組織或者細(xì)胞):細(xì)胞數(shù)量>2.7ⅹ107;

組織樣本>3g

載體測序結(jié)果

實(shí)驗(yàn)過程圖

質(zhì)譜結(jié)果


技術(shù)流程:

 
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