用于篩選CRISPR/Cas9的基因敲除細(xì)胞系的DNA制備方法

CRISPR/Cas9是原核生物的一種免疫應(yīng)答機(jī)制，被用于識別和破壞外來的致病性DNA�？茖W(xué)家們運(yùn)用CRISPR/Cas9原理在真核生物中進(jìn)行基因組編輯，這項(xiàng)技術(shù)被進(jìn)一步用于支持基礎(chǔ)生物研究、開發(fā)生物技術(shù)產(chǎn)品以及治療疾病。盡管這種技術(shù)非常高效，但其中某些步驟可能會很耗時，例如編輯和基因分型分析步驟之間的時間。一般情況下，在用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染后，為了評估編輯效率和篩選攜帶所需基因改變的克隆，細(xì)胞通常在96孔板中進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)擴(kuò)增，以便被用于基因分型，這個時間可能需要長達(dá)3-4周的時間。

MicroGEM公司的prepGEM通用DNA提取試劑盒(#PUN1000)提供了一種靈活的提取方法。它是一種依靠溫度驅(qū)動的單管提取方法，不需要進(jìn)行洗滌和離心步驟，可以在7分鐘內(nèi)從1至96個樣本中提取DNA。

在本應(yīng)用文章中，prepGEM Universal被用于從CRISPR介導(dǎo)的編輯后的單細(xì)胞克隆中提取DNA，以進(jìn)行克隆的篩選, 提取是在轉(zhuǎn)染10天后使用96孔板進(jìn)行的。數(shù)據(jù)表明，prepGEM Universal很適合CRISPR篩選，并提供了一種快速和簡單的方法來提取適合PCR和測序分析。

詳見鏈接：

https://microgembio.com/m_resource/fast-and-simple-dna-preparation-for-the-screening-of-crispr-cas9-generated-knockout-cell-lines