新的MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸試劑盒：兼顧快速和高產率的全新解決方案

前言

MagNA Pure 96是最近進入市場的一種全新儀器：它是一種全自動、超高速的系統(tǒng)，它能用于將高質量核酸從各種樣品類型中高速分離，1小時以內即可完成多至96個樣本的自動純化，處理的樣品容量最高達到1 ml。該系統(tǒng)采用裝有預裝式即用型試劑的優(yōu)化試劑盒，并配有相應的自動分離方法。 這種試劑盒的配置基于沿用已久的磁珠技術，后者成功用于不同的MagNA Pure系統(tǒng)已有多年。MagNA Pure 96試劑盒由配有不同預裝式密封緩沖液容器的試劑盤和含磁粉的專用瓶組成。

可提供的所有試劑盒都有小容量（SV）和大容量（LV）的不同規(guī)格，可根據(jù)要處理的樣品量決定。 本文描述了2種MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸試劑盒及其方法的特征和性能。




圖1：試劑盒組件。 試劑盒、試劑盤、磁珠瓶。

材料和方法

新的試劑盒及方法是用人EDTA血漿、枸櫞酸鹽血漿、血清和全血以及培養(yǎng)細胞（K562和HeLa）作為樣品材料開發(fā)和測試的。

 

全血不需要經過預處理即可用于基因組DNA分離。 培養(yǎng)細胞小球在使用前要懸浮于PBS中。

 

在病毒核酸分離時，使用前在樣品中添加不同量的DNA病毒（巨細胞病毒、EB病毒、細小病毒B19）和RNA病毒（甲型肝炎病毒、甲型H1N1流感病毒）。然后用移液管將樣品移入MagNA Pure 96儀器上的MagNA Pure 96處理盒中。所有樣品至少以8倍復制進行試驗。 根據(jù)實驗需要，純化核酸的洗脫體積被設定為50μl、100μl或200μl。在LightCycler® 480儀器上采用吸光度（OD）測定、瓊脂糖凝膠電泳和/或參數(shù)特定的定量實時PCR和RT-PCR分析對洗脫液進行分析。采用15μl各自混合母液和5μl各自洗脫液建立擴增反應，運行45個循環(huán)。

 

結果和討論

試劑盒的組成：排列在試劑盤中的預裝式試劑容器，便于加載；分開放置、含磁珠（MGP）懸液的瓶子（圖1）。試劑盤和瓶子都在運行前放入儀器抽屜中各自的位置。使用后容器可以方便地重新密封，并保存以待必要時進行后續(xù)的運行。MGP瓶具有特殊的瓶蓋，可以在儀器的針穿過后自動重新密封。所有組件在室溫下都能保持穩(wěn)定。

 

MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸小容量規(guī)格用于從200μl全血，或從5×10⁵個培養(yǎng)細胞中分離基因組DNA。 它還可以從200μl血漿、血清或全血中分離病毒DNA或RNA。試劑盒包括3個預裝式試劑容器，每個容器最多可進行192次反應（即每個試劑盒進行576次純化）。