轉(zhuǎn)基因小鼠

 轉(zhuǎn)基因是將外源DNA通過顯微注射的方法注射到大（�。┦笫芫�卵的原核內(nèi)，注射DNA整合到受精卵的基因組中，并遺傳給后代。維通達(dá)可以提供大小鼠傳統(tǒng)的隨機(jī)轉(zhuǎn)基因和PB 轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因模型制作服務(wù)。通過原核注射，可以獲得不同表達(dá)水平的Founder，每只Founder可能存在插入位點(diǎn)和拷貝數(shù)的不同，因而品系建立時(shí)需要單獨(dú)對(duì)待。成功率與特定基因和小鼠品系相關(guān)。
動(dòng)物品系
F1代小鼠：常用的品系有B6D2F1，B6SJLF1，CD-1XFVB和CD-1XC57BL/6等。雜種品系的優(yōu)勢(shì)是成功率高，繁殖力強(qiáng)，存活率高，可以較快的獲得Founder。對(duì)于較難制作的轉(zhuǎn)基因均采用F1代胚胎獲得founder，然后再回交到需要的背景。
C57BL/6小鼠：目前公布的小鼠基因組測(cè)序結(jié)果來源于C57BL/6小鼠品系。該品系小鼠模型已廣泛應(yīng)用于腫瘤、免疫、遺傳學(xué)等方面的研究， 并已成為常用的標(biāo)準(zhǔn)品系之一。但轉(zhuǎn)基因的效率相對(duì)較低，且C57BL/6生性好斗，易發(fā)生意外。
FVB小鼠：原核大、清晰、近交品系，基因型比較單一；具有易于原核注射的優(yōu)點(diǎn)。
SD大鼠：常用的大鼠模型，適用于安全性評(píng)價(jià)、衰老、免疫和癌癥等方面研究。
 （1）過表達(dá)轉(zhuǎn)基因大（�。┦�
      構(gòu)建上述常規(guī)的帶有啟動(dòng)子和目的基因的表達(dá)載體， 利用原核顯微注射的方法將表達(dá)載體注射到小鼠受精卵中。通過構(gòu)建廣泛性/組織特異性/誘導(dǎo)性等不同的啟動(dòng)子，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因在小鼠組織廣泛性/特異性/特定條件下等的表達(dá)，達(dá)到對(duì)目的基因功能的研究目的。
 （2）shRNA轉(zhuǎn)基因大（�。┦�     
通常采用U6/H1驅(qū)動(dòng)shRNA表達(dá)，設(shè)計(jì)靶序列構(gòu)建shRNA載體，利用原核顯微注射的方法將shRNA載體注射到受精卵中。shRNA被加工成siRNA干擾沉默目的基因，實(shí)現(xiàn)基因功能的研究。
 （3）microRNA轉(zhuǎn)基因大（�。┦�
      構(gòu)建上述兩種microRNA過表達(dá)和下調(diào)載體，通過原核顯微注射將載體注射到受精卵中，通過基因表達(dá)，實(shí)現(xiàn)microRNA過表達(dá)或者下調(diào)。
 （4）可誘導(dǎo)性/組織特異性轉(zhuǎn)基因大（�。┦�
      將構(gòu)建的廣泛表達(dá)啟動(dòng)子-loxp-stop-loxp-轉(zhuǎn)基因載體，通過顯微注射制備組織特異性轉(zhuǎn)基因大（�。┦竽Ｐ�，轉(zhuǎn)基因在正常情況下并不表達(dá)， 只有與相應(yīng)的組織特異性表達(dá)Cre/CreERT2小鼠雜交后，因Stop終止序列在特定的組織中被去除，從而達(dá)到轉(zhuǎn)基因在特定組織中/誘導(dǎo)性特異性表達(dá)的目的。
 （5）BAC轉(zhuǎn)基因大（�。┦�
      Bacterial artificial chromosomes（BACs）是以細(xì)菌F因子為基礎(chǔ)構(gòu)建的細(xì)菌克隆載體。由于其完整性和保真度，可以更好的表征體內(nèi)轉(zhuǎn)基因特征。因此，為了研究完整的時(shí)空特異性基因表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)及調(diào)控元件等，可以將BAC直接進(jìn)行原核顯微注射（約幾十到幾百Kb）或者將其改造后注射在小鼠或大鼠的受精卵中，以獲得轉(zhuǎn)基因鼠。