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> 技術(shù)文章> QPCR
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圖書
1378
次
PCR蓋緊蓋子試劑蒸發(fā)問題詳解
2022-12-6
導(dǎo)讀在PCR實(shí)驗(yàn)中,我們加完反應(yīng)體系后,都會(huì)認(rèn)真仔細(xì)的蓋好蓋子,并反復(fù)確認(rèn)已經(jīng)蓋好了蓋子,以避免出現(xiàn)試劑蒸發(fā)的情況?墒怯袝r(shí)候我們也會(huì)有一些疑惑:明明已經(jīng)確認(rèn)蓋子蓋緊了,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,還
3692
次
熒光定量PCR對(duì)照詳解
2022-11-4
前言吾日三省吾身,定量實(shí)驗(yàn)做對(duì)照了嗎?在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中遇到?jīng)]有曲線、曲線異常等情況,我們總是會(huì)在第一時(shí)間去看陽性對(duì)照和陰性對(duì)照的擴(kuò)增情況來分析原因。由此可見,實(shí)驗(yàn)中做對(duì)照的重要性
2103
次
PCR耗材選擇的問答詳解
2022-10-25
導(dǎo)讀俗話說的好,工欲善其事,必先利其器。耗材的選擇對(duì)得到滿意的PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。在分析PCR結(jié)果時(shí),我們往往側(cè)重于對(duì)引物、酶的濃度、溫度和時(shí)間的分析,卻忽略了PCR耗材也是影響因素之一
1584
次
多重PCR技術(shù)要點(diǎn)解析
2022-10-20
多重PCR概述多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR,它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對(duì)以上引物,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng),其基本原理與常規(guī)PCR相同,區(qū)別在于多重PCR反應(yīng)體
2123
次
Taq酶選型三要素:擴(kuò)增效率、酶動(dòng)力、靈敏度
2022-9-5
導(dǎo)讀目前國內(nèi)市場上銷售的熱啟動(dòng)Taq酶的品牌很多,但真正高質(zhì)量的熱啟動(dòng)Taq酶并不多,面對(duì)這么多的熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品,我們應(yīng)如何選擇?首先,選擇擴(kuò)增效率高的熱啟動(dòng)Taq酶耐受性好的Taq酶反應(yīng)體系
3622
次
qPCR體系優(yōu)化和常見問題解析大全
2022-8-15
前言聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(以下簡稱qPCR)作為第二代PCR技術(shù),自1996年推出以來,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原微生物檢測(cè)、
3682
次
普通PCR引物與qPCR引物的對(duì)比與選擇詳解
2022-8-3
導(dǎo)讀說起引物,大家都再熟悉不過了。引物,在核苷酸聚合作用的起始時(shí),可以刺激合成另一種大分子,并與反應(yīng)物以共價(jià)鍵形式連接的序列。在核酸化學(xué)中,引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段,可結(jié)合在
3894
次
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中熒光標(biāo)記的選擇詳解
2022-7-22
熒光定量PCR技術(shù)是將常規(guī)的PCR和熒光檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,以此實(shí)現(xiàn)對(duì)初始模板的定量分析。熒光定量PCR技術(shù)作為當(dāng)今生物學(xué)研究的重要手段之一,在基礎(chǔ)科學(xué)、生
1346
次
qPCR實(shí)驗(yàn)之核酸提取MIQE明確的要點(diǎn)詳解
2022-6-22
前言MIQE是描述評(píng)估qPCR實(shí)驗(yàn)所需的最小信息,該指南是稿件投稿時(shí)需要同時(shí)提交的一個(gè)清單。通過作者提供相關(guān)的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)特點(diǎn),審稿人可以評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)所用方法的可靠性。另外提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)所用
1136
次
qPCR實(shí)驗(yàn)中安全科學(xué)地取材操作詳解
2022-6-10
規(guī)劃一個(gè)qPCR實(shí)驗(yàn)時(shí),最先碰到的問題就是研究目的和材料的選擇。要想做好一個(gè)qPCR實(shí)驗(yàn)首先要根據(jù)目的選好材料。以目標(biāo)為導(dǎo)向的取材研究目標(biāo)的設(shè)立是非常重要的一個(gè)起始環(huán)節(jié),所以對(duì)于樣本取材要
2772
次
如何處理實(shí)時(shí)熒光定量PCR的數(shù)據(jù)詳解
2022-6-6
實(shí)時(shí)熒光定量PCR數(shù)據(jù)中的基本概念:在整個(gè)擴(kuò)增過程中會(huì)出現(xiàn)基線期,指數(shù)期,線性期和平臺(tái)期。其中在基線期和指數(shù)增長期,擴(kuò)增產(chǎn)物都是以指數(shù)級(jí)增長,但是在基線期我們沒辦法檢測(cè);而到了線性期和
2002
次
PCR原理、PCR擴(kuò)增影響因素及預(yù)防詳解
2022-5-10
PCR簡介聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析的一種反應(yīng)。PCR擴(kuò)增原理核
5302
次
qPCR擴(kuò)增過程中影響Ct值的因素及解決辦法詳解
2022-4-27
導(dǎo)讀Ct值是熒光定量PCR重要的結(jié)果呈現(xiàn)形式,它被用于計(jì)算基因表達(dá)量差異或者基因拷貝數(shù)。那么熒光定量的Ct值多大被認(rèn)為是合理?如何保證Ct值的有效范圍呢? Ct值以及Ct值的作用:Ct值概念:也稱
2873
次
實(shí)驗(yàn)過程中核酸降解的預(yù)防手段與方法
2022-4-14
導(dǎo)語在實(shí)驗(yàn)過程中,最心累的莫過于好不容易提取的核酸卻降解了。那么核酸為什么會(huì)發(fā)生降解呢,我們又該如何預(yù)防呢?關(guān)于核酸降解,你了解多少呢?讓我們一起對(duì)核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
1823
次
移取PCR Master Mix對(duì)qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性的影響
2022-3-30
Overview定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)分析具有高靈敏度,這是其成功并廣泛應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的最重要原因之一。然而,包括移液技術(shù)在內(nèi)的許多因素都會(huì)對(duì)qPCR分析的結(jié)果產(chǎn)生影響。在進(jìn)行基于PCR原理的
1062
次
如何改進(jìn)qPCR數(shù)據(jù)報(bào)告
2022-2-24
關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),最常見的應(yīng)用是通過RT-qPCR進(jìn)行基因表達(dá)分析、疾病診斷和管理(如病毒定量)、食品檢測(cè)(如轉(zhuǎn)基因或過敏原分析)以及動(dòng)物或植物育種等研究。這種方法非常靈敏,因此為
3208
次
影響qPCR最終效果的六個(gè)要素分析與解決方法
2021-12-14
實(shí)時(shí)熒光定量PCR:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)(探針或染料),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR反應(yīng)過程,最后通過Cq或Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)起始模板進(jìn)行絕對(duì)定量或相對(duì)定量分析。而評(píng)估熒光定量P
6931
次
qPCR擴(kuò)增曲線的問題綜述與解決方法總結(jié)
2021-12-1
大家好!首先跟大家做一個(gè)自我介紹:我是擴(kuò)增曲線,來自熒光定量PCR,是用于描述qPCR動(dòng)態(tài)進(jìn)程的曲線,我有兩種形態(tài),一種是線性圖譜:橫坐標(biāo)是循環(huán)數(shù),縱坐標(biāo)是熒光強(qiáng)度值;另一種是對(duì)數(shù)圖譜:橫
1485
次
Azure Cielo™實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)在檢測(cè)低拷貝端;虻膽(yīng)用
2021-11-24
我們都知道在實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)中,可以通過Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣本的初始拷貝數(shù)。但Cq值與樣品中靶標(biāo)的拷貝數(shù)有關(guān),也會(huì)受到PCR反應(yīng)的效率和儀器檢測(cè)靈敏度的影響。高靈敏度的儀器可以減少檢
6302
次
一文攬盡:熒光定量PCR擴(kuò)增曲線哪個(gè)階段最重要
2021-11-17
qPCR擴(kuò)增曲線一般分成四個(gè)階段:基線期、指數(shù)期、線性期和平臺(tái)期。那么每個(gè)階段PCR產(chǎn)物量的變化都有什么區(qū)別呢?哪個(gè)階段最重要呢?小編這就一一道來;期PCR起始時(shí),剛開始前幾個(gè)循環(huán)的熒光
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